新城疫病毒NP基因5'端非编码区核苷酸缺失/插入对其致病性的影响

非编码区（UTR）在决定病毒的致病性方面发挥着重要作用。本研究小组长期对新城疫病毒（NDV）的分子流行病学调查结果显示，与强毒株相比，弱毒株在核衣壳蛋白基因（NP）5'端UTR通常存在连续6个核苷酸的缺失。为了验证此缺失是否会对NDV的致病性产生影响，本项目拟利用突变PCR技术和已经建立的NDV反向遗传操作系统，构建NP基因5'端UTR突变体病毒，即NP基因5'UTR含有连续6个核苷酸插入的弱毒株突变体和NP基因5'UTR有连续6个核苷酸缺失的强毒株突变体，通过弱毒株的碱基插入和强毒株的碱基缺失，双向探讨NP基因5'UTR连续6碱基突变对NDV毒力及致病性的影响，为深入了解NDV毒力强弱的分子机制奠定基础。

本研究对近年来分离的新城疫病毒国内分离株株进行了测序分析，结果表明近年我国流行的新城疫强毒株均属于基因Ⅶd型，与目前使用的疫苗株B1、LaSota、Clone30和VG/VA等的同源性较低，并且这些流行株均在NP基因5’非编码区处比疫苗株（LaSota等）多6个碱基。为了研究这种现象对病毒致病力的影响，我们分别构建了强毒GM与疫苗株LaSota的反向遗传系统，并在此基础上拟构建NP 基因5’端缺失6nt的重组病毒（rGM-6nt）和NP 5’端插入6nt的重组病毒（rLaSota+6nt），并准备在下一步工作中对这两株突变病毒的生物学特性进行分析。本研究对近年来流行的新城疫强毒株进行了大量分离和系统分析，对了解其遗传演化情况具有重要意义。本研究构建GM株和LaSota株的反向遗传系统，对NP基因5’非编码区6nt缺失或插入对NDV毒力和致病性的影响进行研究，为该病毒的致病机制研究以及疫苗研发奠定了较好基础。