水稻黑条矮缩病毒毒质形成的机制及其对细胞活动的影响

水稻黑条矮缩病毒（RBSDV）是由灰飞虱传播的一种植物双链RNA病毒，属于世界上寄主分布最广泛的呼肠孤病毒。这一类病毒都具有非常精密而复杂的生存机制。大多数呼肠孤病毒在细胞中都能形成毒质结构，有研究者对正呼肠孤病毒在动物细胞中形成毒质的功能进行过推测，但对毒质形成的机制，以及毒质的形成对寄主细胞的影响还没有任何报道。国内外研究者对RBSDV在寄主植物细胞中形成的毒质也仅进行过观察类报道。本项目旨在通过昆虫细胞和植物细胞两种研究体系，明确RBSDV在两种不同细胞中形成毒质的机制如何。同时研究毒质的形成对昆虫、植物细胞产生的影响，最终通过分析RBSDV 在细胞中形成毒质的结构与功能来揭示病毒生命活动中的特殊机制和关键因子， 探索病毒胁迫寄主因子参与其复制活动的机制。本项目不仅可以更深入地了解病毒与寄主的相互作用，而且为更科学合理地解决农业生产问题奠定基础。

水稻黑条矮缩病毒（Rice black-streaked dwarf virus，RBSDV）是斐济病毒属的成员，侵染玉米和水稻后给亚洲地区农业生产带来的巨大损失。同其它呼长孤病毒成员一样，RBSDV的复制与装配是在细胞质病毒包涵体亦通常被称作毒质的结构里进行的。RBSDV的第九条片段 （S9）的第一个阅读框（ORF）蛋白P9-1是形成毒质的关键蛋白，双分子荧光互补（BiFC）实验证明了，P9-1具有自我互作的能力。我们通过P9-1的免疫共沉淀（CO-IP）实验分析RBSDV毒质的蛋白组成与结构，其中非结构蛋白P5与P6参与了毒质的构建。结果表明P6是通过直接与P9-1的结合而被招募到病毒包涵体上，而P5是通过与P6的互作间接募集到毒质结构中的，此研究为毒质组建过程中募集非结构蛋白提供了生物学模型。另外，通过对比分析RBSDV，RSV, HiPV等病毒在昆虫寄主形成的小RNA特点，研究了不同病毒诱导的基因沉默免疫反应，以及不同寄主细胞免疫反应过程中对毒质基因的剪切差异。