蟾毒内酯类化合物心脏毒性机理和构效关系研究

蟾毒内酯类化合物为中药蟾酥的主要活性成分，该类化合物具有显著的体内外抗肿瘤活性。然而该类化合物同时也具有很强的心脏毒性，由于误服或过量服用而导致的中毒事件时有发生。一般认为其毒性是源于对Na+/K+-ATP酶的抑制，但存在争议。我们的前期研究发现其毒性显著强于地高辛等Na+/K+-ATP酶抑制剂，并且Na+/K+-ATPase调节剂利多卡因只能轻微拮抗其毒性，而β-受体阻滞剂心得安亦可减弱其毒性。因此，该类化合物的心脏毒性机制尚不清楚。我们拟继续从蟾酥中分离鉴定蟾毒内酯类化合物；研究不同结构的化合物对心脏毒性和构效关系；从酶、受体及离子通道三方面研究此类化合物的毒性机制，为阐明其毒理机制和寻找高效低毒的创新药物提供科学依据。

本项目主要从以下几个方面开展研究，研究蟾蜍内酯类化合物的心脏毒作用机理和构效关系：.（1）本项目运用各种分离手段从蟾酥中获得了一系列蟾蜍内酯类化合物，并通过光谱学方法鉴定了它们的立体构型。此外，我们还通过组合衍生化和结构修饰的方法构建了蟾蜍内酯类化合物库，为后续的心脏毒性研究提供丰富的样品。.（2）在SD大鼠模型上，运用心电图实验评价了总蟾蜍内酯类化合物，以及运用利多卡因，硝苯地平，阿托品，甾醇类化合物对抗蟾蜍内酯类化合物的心脏毒性。我们发现钠离子通道阻滞剂利多卡因和钙离子通道阻滞剂硝苯地平都可以一定程度的缓解蟾蜍内酯类化合物的心脏毒性。.（3）通过研究蟾蜍内酯类化合物对Na+/K+ ATP酶的作用，我们发现这类化合物对Na+/K+ ATP酶的抑制作用有明显的立体选择性，其中14位β羟基的和17位内酯环的存在对抑制作用的保持十分关键。.（4）通过全细胞膜片钳实验，我们发现B3对容积H9c2心肌细胞氯通道没有影响，但对新生大鼠的心肌细胞的钙通道有抑制作用，而对新生大鼠的钠通道有双向调节的作用。此外我们还考查了B3，B7等对hERG钾电流的的影响，结果表明这类化合物对钾离子通道没有明显的抑制。最后，我们还考查了B3对诱导多能干细胞(iPSC)来源的心肌细胞的钠电流影响，发现该类化合物可对诱导多能干细胞(iPSC)来源的心肌细胞的钠电流具有明显的抑制作用。. 通过我们的研究首次发现了，蟾蜍内酯类化合物对心脏的毒性作用，不仅与其对Na+/K+ ATP酶的抑制作用有关，还与其对钠离子通道和钙离子通道的作用密切相关。 目前，我们在国内外核心期刊上发表研究论文6篇，其中SCI论文5篇。此外还有两篇文章正在整理中。培养博士研究生1名（在读），硕士研究生4名（3名已毕业）。