后三里穴深、浅刺激镇痛作用的差异及其神经支配与组织化学机制

Needle insertion depth is an important factor in acupuncture treatment, which is not only attached great importance by acupuncturists, but also becomes a hotspot in acupuncture research in recent decades. Previous clincal studies have shown that there was difference of the curative effect between deep and shallow needling in treating diseases, yet the mechanism was unknown. In this study, we will exlpore the mechnism of the different effect between deep and shallow needling by using a model of inflammatory pain induced by Complete Freund’s adjuvant (CFA) in rats. Acupoint Housanli (corresponding to Zusanli in human) was chosen and high-sensitive neural tracing , immunofluorescence, praxiology, molecular biology and laser confocal microscopic techniques were introduced to investigate the difference of neural and neuroactive components between superficial and deep tissue in local acupoint. We also investigated the difference of analgesic effect between shallow and deep needling, and its relationship with the changes of chemical substances in acupoint region. This study will provide scientific basis for further revealing the mechanism of deep and shallow needling, which should benefit selecting the appropriate needle insertion depth for inflammatory pain therapy and improve the efficacy of clinical acupuncture.

进针深度是针灸治疗的重要组成部分并直接影响针刺治疗的效果，不仅为历代针灸医家所重视，同时也是目前针灸研究中的热点。虽然早期的研究结果已经从不同侧面显示了穴位深、浅刺的一些作用特点，但是目前对深、浅刺作用的评价更多的是基于临床疗效的观察而缺少系统的基础性实验研究。为了深入研究穴位深、浅刺的作用机制，本研究拟从正常和炎性痛模型大鼠入手，以后三里穴区（相当于人体足三里穴）为切入点，综合运用新一代高敏感神经示踪、多重免疫荧光组织化学、行为学、分子生物学和共聚焦显微镜成像等技术，对与穴位深、浅刺相关的皮肤和肌肉组织的神经支配和化学特征进行系统观察，并在此基础上对后三里穴进行不同深度的电针刺激来评价深、浅刺镇痛作用的差异，以及深、浅刺后穴区不同层次组织中化学物质表达的变化。本研究结果将为深入揭示穴位深、浅刺的作用机制提供更多的科学依据，对针灸临床选取适当的进针深度进行更有效的治疗具有重要的指导意义。

进针深度是针灸治疗的重要组成部分并直接影响针刺治疗的效果，为历代针灸医家所重视。虽然早期的研究结果已经从不同侧面显示了穴位深、浅刺的一些作用特点，但是目前对深、浅刺作用的评价更多的是基于临床疗效的观察而缺少系统的基础性实验研究。为了深入研究穴位深、浅刺的作用机制，本研究从正常和炎性痛模型大鼠入手，以后三里穴区为切入点，综合运用神经示踪、多重免疫荧光组织化学、行为学和共聚焦显微镜成像等技术深入研究了与后三里穴深、浅刺相关的皮肤和肌肉组织的神经支配和神经化学成分的差异性，并在此基础上研究了该穴深、浅电针对炎性痛模型大鼠的镇痛作用，以及深、浅刺后炎症局部、脊神经节、脊髓和穴位局部中相关细胞和化学物质的变化。研究显示支配后三里穴区皮肤组织的感觉神经元数量多于肌肉组织，且与传导伤害性感觉密切相关的小型感觉神经元所占比例也高于肌肉组织。给予后三里穴深、浅电针均可以提高炎性痛模型大鼠的机械痛阈和热痛阈，但其外周和中枢的镇痛机制不尽相同。在炎症部位，给予深、浅电针均减少了炎症局部肥大细胞的数量并抑制了其激活状态，同时减少了5-HT等致痛物质的合成和释放。同时，深、浅电针通过调控脊神经节中VR1受体及与疼痛相关化学物质的表达来改变外周敏化状态；通过调节脊髓背角中小胶质细胞的活化状态、CGRP受体的表达和中间神经元的活性来抑制中枢敏化状态，从而起到镇痛作用。与浅刺相比，深部电针更强的抑制了脊髓背角中小胶质细胞的活化状态，且增加了CB免疫阳性中间神经元的数量，因此穴位深刺对炎性痛模型大鼠的中枢敏化状态发挥了更强的抑制作用。而受到更多感觉神经元支配的皮肤部位的浅刺通过抑制外周敏化和调节脊髓背角中CGRP受体和PV的表达，对炎性痛模型大鼠起到了相同的镇痛作用。本课题的研究为揭示穴位深、浅刺的作用机制提供了新的神经解剖学和生物化学依据，并为针灸临床治疗炎性痛选取适当的针刺深度提供了科学依据。