转位蛋白18KDa介导芍药苷防治脑胶质瘤的作用机制研究

Glioma is the most common primary malignant tumor in central nervous system. Translocator protein(TSPO), which represents as the starting pointand the important rate-limiting step in neurosteroidogenesis, has received increased attention inthe pathophysiology of glioma. Our findings had shown that paeoniflorin had selective affinity in TSPO. However, little is known about the treatment of paeoniflorin on glioma. Therefore, it is important to explorethe effect of paeoniflorin on the treatment of glioma. The data showed that paeoniflorin had the significant inhibitory effects on glioma cells. Meanwhile, we found that paeoniflorin decreased the levels of allopregnanolone from glioma. The findings indicated that inhibitory effects of paeoniflorin on glioma cells were associated with decreased the levels of allopregnanolone, which is mediated by TSPO. The present study aim to explore the role of TSPO and biosynthesis of neurosteriods in the effects of paeoniflorin on glioma in animals and cells levels to provide theoretical and experimental basis for the effects of paeoniflorin on glioma.

脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发恶性肿瘤。18KDa转位蛋白（Translocator protein, TSPO）启动神经类固醇生物合成，并与肿瘤的发病机制密切相关。项目组前期试验证实芍药苷高亲合于TSPO，然而，芍药苷防治胶质瘤效应尚未见报。据此，研究芍药苷防治胶质瘤效应对突破该领域新药研究具有重要意义。我们前期研究发现芍药苷对胶质瘤细胞增殖具有显著的抑制作用。同时发现芍药苷可下调胶质瘤细胞所分泌的四氢孕酮水平。研究结果提示芍药苷抑制胶质瘤增殖可能与通过下调TSPO介导的四氢孕酮水平有关。本研究将继续以TPSO介导芍药苷防治胶质瘤效应的作用机制为研究核心，通过动物水平和细胞水平，探讨TSPO以及下游四氢孕酮生物合成在芍药苷防治胶质瘤中的作用，为芍药苷防治脑胶质瘤临床应用提供理论和实验基础。

在国家自然科学基金的资助下，本课题组在这三年中对TSPO介导芍药苷防治胶质瘤效应的作用机制进行研究 本项目按照合同要求，主要开展如下研究工作：1.观察芍药苷对U87和U251胶质瘤细胞对TSPO的结合亲和力；2.在U87和U251胶质瘤细胞上，观察芍药苷的体外抗胶质瘤作用，探索芍药苷对胶质瘤细胞增殖的影响，以及对TSPO相关蛋白的调控作用；3.建立胶质瘤裸鼠皮下移植模型，检测芍药苷对移植瘤生长的作用，分析各组裸鼠生存期。同时，以TSPO拮抗剂PK11195为阳性对照药，对比芍药苷与TSPO拮抗剂PK11195对移植瘤生长抑制的差别；4.通过体外细胞实验，探索芍药苷联合替莫唑胺抑制原代胶质瘤细胞增殖的增效减毒作用，通过网络药理学探索芍药苷的潜在蛋白作用靶点。. 以上所有工作均按计划进行。芍药苷在U87和U251胶质瘤细胞显示出对TSPO的高亲和力。芍药苷能够抑制U87和U251胶质瘤细胞增殖并抑制细胞内TSPO相关蛋白的表达。胶质瘤裸鼠皮下移植模型显示芍药苷能显著抑制胶质瘤体内生长，抑制效果优于TSPO拮抗剂PK11195。采用网络药理学分析，发现Src/STAT3信号通路可能是芍药苷协同替莫唑胺增效减毒抑制胶质瘤的作用靶点。本项目明确了TSPO在芍药苷抑制胶质瘤增殖和生长中的作用，丰富了芍药苷治疗胶质瘤疗效机制的认知，为胶质瘤的防治探索了一条新的思路和途径。