维A酸纠正光老化皮肤真皮胶原异常的作用机制研究

Retinoids could correct abnormal dermal collagen in photoaging skin. But it is not clear if RAR/RXR involving in this process. AP-1 is the crossing point of "abnormal dermal collagen forming in photoaging skin" and "retinoids actions in vivo" . In this project, we will carry out experiments（animal experiment，skin organ culture and collagenoblast culture in vitro）in photoaging model of BALB/C hairless mouse. By interventions of retinol，at-RA，agonists and antagons of RAR/RXR, we will detect the expression of collagen(I and III), MMP(1 and 3), c-jun and c-fos. Detecting the activity of AP-1 in derma and cultured cells by EMSA. Detecting Bonding information between AP-1 and promoters of target genes ( including precollagen I, III and MMP1, 3) in derma and cultured cells by CHIP. By this investigation we expect to understand that if RAR/RXR involving in this process of retinoids correcting abnormal dermal collagen in photoaging skin. Meanwhile we expect to clear interrelation in "alteration in dermal collagen of photoaging skin", "RAR/RXR" and "AP-1".

维A酸能显著改善光老化皮肤的真皮胶原异常，但该过程是否涉及维A酸受体机制，尚不清楚。转录因子激活蛋白1（AP-1）是"光老化真皮胶原改变机制"与"维A酸体内作用机制"的交叉点。本项目以"BALB/C突变无毛小鼠光老化动物模型"为基础，进行动物体内、皮肤器官及成纤维细胞体外培养实验。通过维生素A、at-RA、维A酸受体激动剂及拮抗剂的干预，采用多种方法，检测干预前后I、III型胶原、MMP1、MMP3、c-jun和c-fos的蛋白及mRNA表达变化。采用EMSA法检测干预前后真皮或培养细胞中AP-1的活性变化。通过CHIP技术分析干预前后AP-1与MMP-1、MMP-3、I、III型前胶原基因转录子的结合情况。以期明确维A酸在纠正光老化真皮胶原改变过程中，是否有维A酸受体机制介入，同时了解"光老化真皮胶原改变"、"维A酸受体"及"AP-1"的相互关系。

皮肤光老化是慢性日光照射的产物，光老化皮肤真皮胶原改变是皮肤光老化的重要特征，主要表现为真皮中的I、III型胶原含量减少及结构异常。众所周知，全反式维A酸（at-RA）是目前唯一公认的能够纠正皮肤光老化的外用治疗药物，它能够缓解光老化皮肤的皱纹形成，增加光老化皮肤真皮中的胶原含量，并抑制胶原降解，但其具体作用机制不明。一般认为，at-RA在体内主要是通过其受体（RAR/RXR）途径发挥药理作用，然而，在at-RA纠正光老化真皮胶原改变的过程中是否涉及到受体机制，目前未见明确报道。在本次研究中，我们通过UV（UVA和UVB）照射ICR小鼠16周后，成功构建了皮肤光老化小鼠模型。在该模型的基础上，通过局部应用at-RA、RAR/RXR激动剂和拮抗剂干预8周，检测分析真皮中I、III型胶原变化，并检测真皮中基质金属蛋白酶1、3（MMP-1和MMP-3）的表达情况。结果显示，at-RA和RAR激动剂均能显著增加光老化皮肤真皮的胶原含量，能够显著抑制MMP-1、3的表达，而RXR激动剂则无此作用。此外，研究结果还显示RAR拮抗剂能够抑制at-RA和RAR激动剂的这些作用。这些结果说明，at-RA在纠正光老化皮肤真皮胶原改变的过程中，涉及到了维A酸受体作用机制，在此过程中RAR起着关键作用。此外，这些研究结果也说明在at-RA可通过RAR实现对MMP1、MMP3的表达抑制，从而实现其抑制真皮胶原降解的作用。通过本次研究，为今后开发新型治疗皮肤光老化的受体选择性维A酸类药物提供了新思路。