运载治疗基因的大容量和高滴度超级腺病毒载体系统研究

本研究旨在构建滴度高、容量大的腺病毒载体。研究包括建立异位补偿腺病毒载体的包装细胞，载体的改建和导入并包装出腺毒。经实验获得三株分别导入腺病毒E2、E2a和E4区基因的293包装细胞，为重组腺病毒的构建提供了更有效的包装细胞。同时证实AAV的ITR能将12Kb的外源基因整合至人细胞基因组，表明AAV是一种有用的转导基因载体。改建了腺病毒载体，但是经反复试验均未能在新建的包装细胞中得到腺病毒，究其原因可能与腺病毒基因组结构复杂，其早晚基因交互排列和酶切位点多，造成操作困难，构建的载体进入细胞内未能按想象的工作。