靶向CCL2信号通路及肿瘤新生血管的乳腺癌联合治疗实验研究

Metastasis is the main reason leading to the death of breast cancer patients and also restrains the efficacy and prognosis of treatment. Clinical data and basic studies have shown that tumor-associated macrophages (TAM) in the tumor microenvironment promote invasion and metastasis of breast cancer. Chemokine and its receptor (CCL2-CCR2) signaling pathway plays a crucial role in the recruitment of TAM in breast cancer local tissues. Therefore, this study, based on the collaboration of CICMAS and NCNT, will target the CCL2-CCR2 signalling pathway and use TAM-targeted siRNA biocompatible nanoparticles to silence CCR2 mRNA in combination with inhibition of tumor angiogenensis of IL-6 neutralizing antibody to selectively inhibit the recruitment of these cells in the breast cancer tissues. It will provide a new strategy in breast cancer therapy.

远处转移是导致乳腺癌患者死亡的主要原因，同时也严重影响了治疗的疗效和预后。肿瘤微环境中肿瘤相关巨噬细胞（Tumor-associated macrophages，TAM）是促进乳腺癌侵袭和转移的重要免疫细胞。趋化因子及其受体（CCL2-CCR2）信号通路为TAM在乳腺癌组织中的募集起到至关重要的作用。因此，本研究将结合以往的工作基础，联合中国医学科学院肿瘤医院和国家纳米科学中心团队，构建生物安全性好、高效靶向并且适用于体内实验的纳米载体，携带针对TAM表面受体的CCR2-siRNA，特异性敲降细胞表面CCR2分子，抑制乳腺癌中CCL2-CCR2信号通路，阻断单核细胞向肿瘤组织的募集，并且利用IL-6中和抗体，减少肿瘤微环境中新生血管形成，联合抑制乳腺癌的生长和转移，为探索乳腺癌的治疗方式提供新的方法和策略。

2020年最新研究数据显示，乳腺癌已经取代肺癌，成为全球第一大癌症，远处转移是导致乳腺癌患者死亡的主要原因。基础研究和临床资料表明，肿瘤微环境中肿瘤相关巨噬细胞（TAM）与肿瘤血管生成、不良预后、高复发率和较低的总生存率密切相关。对TAM表面的趋化因子受体进行修饰，减少TAM向肿瘤部位的浸润，是抑制乳腺癌生长和转移的重要途径。. 在本研究中，我们构建了巨噬细胞靶向性的纳米材料P-pep，并在细胞水平验证了P-pep对巨噬细胞的靶向性。采用固相合成的方式合成了靶向巨噬细胞的多肽pep，采用Michael加成法合成了两亲性（β-氨基酯）共聚物P，并通过连接反应得到Zeta电位值为36.5±4.18mV的纳米材料P-pep，用1HNMR对其结构进行表征。建立了原代巨噬细胞制备，培养及极化诱导平台，并通过流式细胞术对巨噬细胞及极化后亚型进行了鉴定。在细胞水平对P-pep的靶向性进行了验证，流式细胞术以及倒置荧光显微镜结果显示，P-pep对不同亚型的巨噬细胞均有较好的靶向性，其中对M1型巨噬细胞靶向性最高。.本研究初步构建了巨噬细胞靶向性的纳米材料，进一步的研究可利用纳米材料负载的多种功能分子，对巨噬细胞实现不同的靶向性修饰，为肿瘤的生物治疗提供新的方法和途径。