以前期筛选研究获得的小白菜抗、耐Cd基因型"Dr-SHQ"和"Kt-RBD"为材料,以50μmol/l的Cd离子室内水培胁迫培养48h, 提取供试材料总RNA。分别以前期研究从"Dr-SHQ"和"Kt-RBD"克隆得到的半胱氨酸合成酶(Cysteine Synthetase,CS)编码基因的保守序列和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthetase, γ-GCS)编码基因的cDNA差异表达片段设计特异引物,采用3'端和5'端RACE克隆方案,克隆小白菜半胱氨酸合成酶、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶编码基因全序列。转化烟草后,测定其与植物抗/耐Cd相关的谷胱甘肽(Glutathine,GSH)代谢产物及其酶体系,包括谷胱甘肽、谷氨酸、半胱氨酸、丝氨酸含量以及半胱氨酸合成酶(CS)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶活性,以鉴定目标基因的功能。
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数据更新时间:2023-05-31
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