MicroRNA-350抑制p38和JNK通道诱发心肌肥厚的分子生物学机制研究

Cardiac hypertrophy is a common pathophysiological process consisted of the number of cardiovascular diseases, such as hypertension, ischemic heart disease, myocardial and vascular disease, and an independent risk factors of cardiovascular disease. The out of control for miRNA expression was confirmed in the heart and blood vessels diseases by the studying of miRNA. But it is not clear for the microRNA regulation mechanism of cardiac hypertrophy and need to further research. The myocardial hypertrophy specific microRNAs (miR-350) screened by gene chip technology in our group, which has not been reported, is as a research target, at miR-350 regulation of cellular, animal level and its target gene expression using qRT-PCR, Western blotting and immunocytochemical method to explore the mechanism of cardiac hypertrophy miR-350 regulation. To collect relevant clinical specimens, and validation of miR-350 regulation of cardiac hypertrophy in the human body..In our research projects, by combining of the study of biological basis mechanisms with the concepts of translational medicine through the implementation of the subject, miR-350 is as a candidate of drug targets and molecular biological markers for early diagnosis of myocardial hypertrophy, disease progression, drug selection, prognosis judgment etc. To do solid early research in the further clinical application.

心肌肥厚是许多心血管疾病如高血压、缺血性心脏病和血管疾病共同的病理生理过程，是独立的心血管危险因素。miRNA 的研究报道证实了在有疾患的心脏和血管中miRNA的表达失控。但部分microRNA调控心肌肥厚的机制还不明确，还需要更深入的研究。本课题组通过基因芯片技术筛选到尚未报道的心肌肥厚特异性microRNA（miR-350），并以此为研究靶点，在细胞和动物水平调控miR-350及其靶基因的表达，利用qRT-PCR,Western blotting及免疫细胞化学法等探索miR-350调控心肌肥厚的作用机制。同时收集相关的临床标本，验证miR-350对人体内心肌肥厚的调控。.课题既结合生物学基础机制的研究，同时将转化医学的理念贯穿于课题实施中，为miR-350作为候选药物靶点及作为分子生物学标志进行心肌肥厚早期诊断、病变进展、药物选择以及预后判断等临床应用做好前期扎实的科研准备。

心肌肥厚是许多心血管疾病如高血压、缺血性心脏病和血管疾病共同的病理生理过程，是独立的心血管危险因素。最近诸多研究已经明确了microRNAs在许多心脏病理生理变化包括心肌肥厚过程中的扮演重要角色。本课题组通过基因芯片技术筛选到尚未报道的心肌肥厚特异性microRNA（miR-350），然而miR-350对心脏的调控作用尚不清楚。本课题在细胞和动物水平调控miR-350 及其靶基因的表达，利用 qPCR、蛋白印迹及免疫细胞化学法等探索 miR-350 调控心肌肥厚的作用机制。旨在明确miR-350可否独立地抑制SAPK信号通路从而诱导病理性心肌肥厚。研究结果证实miR-350在病理性心肌肥厚及心肌细胞凋亡中扮演了重要角色。microRNAs芯片及qPCR技术表明这种独特的miRNA在腹主动脉部分缩窄大鼠末期的心肌组织中表达显著升高；蛋白印迹及荧光酶活性检测实验均显示miR-350的靶基因是丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)11/14和MAPK8/9；运用功能获得与功能丧失的方法研究miR-350功能性角色，过表达miR-350能抑制p38及 JNK的蛋白合成从而有效的诱导心肌肥厚，并且促进NFATc3的失磷酸化及转核，从而引起心肌肥厚标志物的过表达。正如预测的那样，siR-JNK / p38可通过降解p38 和 JNK mRNAs有效的模仿上述变化。反之，与antagomir-350错义序列相比，antagomir-350可以降低miR-350的表达水平，扭转对靶基因(MAPK)11/14和MAPK8/9蛋白表达的抑制，减少细胞大小和细胞凋亡。本课题的研究结果首次证实了miR-350是大鼠心脏肥大和凋亡的关键调控子。