Gal-9在自身免疫病中的特异性调节机制研究

Gal-9/Tim-3信号通路通过诱导T细胞凋亡在免疫耐受的诱导及自身免疫病防治中发挥重要作用，但近来发现该通路也可通过活化DC等细胞促进机体的免疫应答。为了明确Gal-9在自身免疫病中的特异性调节机制，使其更有效地用于自身免疫病免疫干预，本项目拟以T效应细胞为靶点，以DC细胞为参照：1）运用免疫沉淀、质谱分析等技术探讨Gal-9介导两种不同功能的信号传导机制，明确Gal-9/Tim-3是否通过特异性的膜受体相关分子或信号传导分子诱导T细胞凋亡；2）基于计算机模拟的Gal-9/Tim-3作用复合物结构设计Gal-9点突变体，分析Gal-9介导两种功能的结构基础，明确Gal-9是否通过特异性结构（特定突变体）诱导T细胞凋亡； 3）运用I型糖尿病及炎性肠病动物模型，验证上述特异性受体相关分子或突变体在自身免疫病干预中的可能作用。

本项目按计划围绕Gal-9/Tim-3调控T细胞及天然免疫细胞的分子机制及意义展开。主要探讨了Gal-9调控T细胞及天然免疫细胞（DC）的不同机制，Gal-9/Tim-3通路的异常与临床疾病的关系，Gal-9/Tim-3通路在免疫稳态调控中的作用等内容。截至目前，已经发表标有本项目资助号的SCI文章8篇（见附件），申请国家发明专利4项，其中1项已经授权（见附件）。圆满完成了预定的目标任务。.主要的研究成果有以下几个方面：.首先是Gal-9结构与功能的关系研究。发现Gal-9N端（Gal-9N）与C端（Gal-9C）尽管都能结合Tim-3，但它们与Tim-3的亲和力、结合模式不同；Gal-9N端在激活PI3K-AKT、P38、NF-kB通路、活化DC中的作用均强于Gal-9C端结构域，而Gal-9C端结构域活化NF-kB通路的作用较弱，更易于诱导T细胞凋亡；该研究为基于Gal-9/Tim-3通路特异性干预DC细胞、T细胞的功能奠定了基础（Li Y, et al. Mol. Immunol. 2011, 48:670，该文章已被Immunity 等杂志引用近20次）。.其次是发现I型糖尿病患者及炎性肠病患者Gal-9和/或Tim-3的表达显著降低，而效应性Th细胞亚群的活性显著升高；干预Gal-9/Tim-3通路能通过影响T细胞的稳态改变自身免疫性疾病的病程，提示该通路在炎症性肠病等自身免疫病干预中具有良好的应用前景（Shi F, et al, Clinical Immunol 2012）。.第三，值得注意的是，我们提出了一个新的Gal-9/Tim-3通路调控天然免疫细胞的模式，既Tim-3在天然免疫中也主要介导负性调控作用，其正常表达是维持天然免疫细胞稳态的关键因素（Han G, et al. Front Immunol,2013,49）。.最后我们深入探讨了Tim-3/Gal-9信号负性调控天然免疫稳态的机制。发现Tim-3能通过抑制LPS介导的NF-kB活化等信号机制维持巨噬细胞稳态。该研究为探讨基于Gal-9/Tim-3通路的免疫损伤性疾病新干预策略奠定了坚实的基础（Yang X, et al. Journal of Immunology 2013:2068）。.我们还探讨了Gal-9/Tim-3通路相关的其它免疫调控机制。