利用分子病毒学技术和缺陷型病毒颗粒形成的原理,建立了脊髓灰质炎病毒缺陷型表达载体,系统I由两个重组质粒组成,即pXHB-S和pRC-PV。前者在VP2-VP3-VP1区,由需表达的外源目的基因HBV的S区和前S区取代;后者是由pRcCMV载体表达整个VP壳蛋白区。经共转染及纯化得到重组体,经点杂交,Western blot证实为含有HBS-S基因片段及脊灰病毒蛋白壳体缺陷型脊灰病毒。其感染细胞后,可获得HBS-S抗原在细胞内的表达。系统II包括一个通用型质粒和一个已经转染并稳定表达脊灰病毒壳蛋白的CHO细胞,该质粒含有脊灰病毒除VP蛋白的全部基因区域,同时加入一个多克隆位点区,经常规转染入该细胞后可以根据在镜下直接显示由于缺陷颗粒的形成而导致的细胞病变收取病毒,该系统是一初步具有使用意义的缺陷型重组载体系统。
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数据更新时间:2023-05-31
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