外源性EPO调控隐睾生殖内分泌功能及作用机制研究

隐睾是男性常见的泌尿生殖畸形，最严重的并发症是"不育"和"癌变"。对社会人口生殖健康、优生优育产生严重影响。.隐睾"不育"及"恶变"的关键环节，一是生殖母细胞迁移分化延迟或障碍；二是4-5岁时，基底室Ad精原细胞不能启动第一次减数分裂。本项目前期研究证实，隐睾生殖发育缺陷的主要机制是Sertoli细胞数量不足、骨架结构紊乱，Leydig细胞发育不良，并导致调控Sertoli细胞-生殖细胞连接功能障碍。本项目继续针对这些关键环节，采用宫内氟它胺（Flu）诱导SD大鼠隐睾模型，以及临床隐睾活检组织体外组织培养系统，在细胞、基因、蛋白等水平上，研究外源性EPO调控隐睾生殖发育潜能，以及作用机制；EPO对正常睾丸及隐睾生殖、内分泌功能的影响；EPO干预隐睾的时机选择；临床预判隐睾适宜EPO干预的指标。为临床应用外源性EPO促进隐睾生殖发育的体内临床试验奠定基础。

隐睾是常见的泌尿生殖系统先天畸形，其最严重并发症是不育及癌变。目前对隐睾最主要治疗方法为手术治疗，虽然此法能达到解剖学复位，但术后不育及癌变的风险仍较高。有学者尝试用HCG及LHRH等药物对隐睾患儿进行治疗，但副作用多，且其疗效仍有争议。近年，研究证实促红细胞生成素（EPO）具有旁分泌功能促进生殖细胞发育的作用。但EPO是否具有恢复胚胎性隐睾所致的生殖细胞丢失，目前少有文献报道。本项目致力于探索治疗隐睾症的新方法，采用宫内氟他胺（Flu）诱导SD大鼠建立隐睾模型，以及临床隐睾活检组织、人未成熟睾丸体外组织培养系统，在基因、蛋白水平上，研究外源性EPO调控隐睾生殖发育潜能，以及作用机制；EPO对正常睾丸及隐睾生殖、内分泌功能的影响；EPO对睾丸原代leydig细胞增殖分化及内分泌功能的影响。本研究成功建立了睾丸组织长期体外培养体系，并在体外培养条件下将人未成熟睾丸组织中精原细胞发育成精母细胞。本研究证实外源性EPO可提高胚胎期Flu诱导SD大鼠隐睾模型的生殖潜能，并促进睾丸组织内睾酮含量升高，调控Sertoli细胞-生殖细胞连接功能，维持睾丸组织Connexion43蛋白质的正常表达；研究发现外源性EPO可促进睾丸原代leydig细胞培养液中睾酮含量增加，该作用是通过促进睾丸leydig干细胞（SLCs）增殖，增加leydig细胞数量有关。通过本项研究，为探索隐睾症的治疗方法提供了新思路，为临床应用外源性EPO促进隐睾生殖发育的体内临床试验奠定了基础。