USP22在小鼠子宫蜕膜化过程中的表达与功能研究

Ubiquitin-specific protease 22 (USP22), a new cancer stem cell marker, plays a crucial role in tumor proliferation, differentiation and invasion. Previously, we found for the first time that the USP22 is expressed in human uterine decidual tissue during early pregnancy, and is down-regulated in recurrent spontaneous abortion group when compared with normal pregnancy group. Furthermore, gene sequencing results demonstrated that usp22 mRNA is highly expressed at embryo implantation sites in mouse uterus on days 5 and 8 of pregnancy. All these results indicate that USP22 gene is involved in uterine decidualization. However, the expression, regulation and function of USP22 in uterus during decidualization and its underlying molecular mechanisms are still unclear. In this study, we intend to discover the expression pattern, regulatory mechanism and biological functions of USP22 in mouse uterus during decidualization by varied models and a variety of methods, including in situ hybridization, real-time PCR, western blot and CRISPR/Cas9 gene knock-out system. Our study will exposes new insights into the physiological and pathological roles of USP22 during uterine decidualization, which help to deeply understand the mechanisms of decidualization.

泛素特异性水解酶（USP22）是一种新发现的肿瘤标记基因，在肿瘤的增殖、分化和侵袭过程中发挥着重要的作用。我们前期实验首次发现，USP22在人早孕期蜕膜组织中表达，且复发性自然流产患者蜕膜组织中USP22的表达较正常妊娠妇女下调；同时，小鼠妊娠D5和D8蜕膜组织基因测序结果显示usp22在胚胎着床点表达明显上调，提示该基因可能参与了子宫内膜蜕膜化过程。但是USP22在子宫内膜蜕膜化中的表达规律、调节因素、生理功能及其分子机制等均不清楚。本研究拟建立体内动物模型和体外模型，通过原位杂交、荧光定量PCR、Western Blot及CRISPR/Cas9靶向基因敲除等方法研究USP22在小鼠子宫内膜蜕膜化过程中的表达及对蜕膜化功能的影响，进而探索其中的分子机制。研究结果将揭示USP22在子宫内膜蜕膜化过程中的生理、病理功能，对于深入理解子宫内膜蜕膜化机理具有重要意义。

泛素特异性水解酶（USP22）是一种新发现的肿瘤标记基因，在肿瘤的增殖、分化和侵袭 过程中发挥着重要的作用。我们前期研究发现，USP22在子宫内膜蜕膜化过程中可能发挥重要的调节作用，但具体表达及调节机制尚不清楚。本项目以构建体内动物模型和体外模型为基础，通过原位杂交、荧光定量PCR、Western Blot及基因沉默等方法，分析（1）小鼠早期妊娠子宫中 Usp22 的表达规律；（2）卵巢激素对 Usp22 表达的调控；（3）Usp22 在小鼠子宫内膜蜕膜化进程中的作用；（4）Usp22 影响小鼠子宫内膜蜕膜化进程的分子机制。结果显示：（1）Usp22 在小鼠妊娠早期子宫的表达具有时间和空间差异性；（2）Usp22 在小鼠妊娠早期子宫的表达不受雌孕激素的影响；（3）Usp22 在蜕膜中的表达不依赖于胚胎植入；（4）Usp22 表达水平随着蜕膜化的进行而增高；（5）Usp22 促进小鼠子宫内膜基质细胞的增殖与分化；（6）USP22 在人子宫内膜基质细胞（hESCs）中主要表达于胞质和胞核，可能通过去泛素化孕酮受体来调节 hESCs 蜕膜化。研究结果初步阐明了Usp22在子宫内膜蜕膜化过程中的表达及生物作用，明确这一机制为进一步揭示USP22在子宫蜕膜化过程中的生理、病理功能，对于深入理解子宫蜕膜化机理及不孕症的治疗具有重要意义。