Rho激酶作为炎症性肠病防治新靶标的研究

IBD (inflammatory bowel disease) is always considered concerned with inflammation and immune system disorder. And its major therapy of using anti-inflammatory agent still remains in low efficiency. Therefore, a new target is worth discovering to break through the previous theoretical limitations. Through 20,000 matrix gene chip screening we found that the effect of declining the Rho activating enzyme and inflammation factors simultaneously surpass the effect of declining the inflammation factor solely. This phenomenon indicates that Rho activating enzyme is a potential target of preventing IBD, and research about this is seldom reported. There is a commonsense that Rho enzyme is the new target of microcirculation disease, and according to relevant reports, disorder of microcirculation is one of IBD occurrence mechanisms. To make a conclusion, we can hypothesize that through mediating colon microcirculation function Rho enzyme possibly regulates the IBD occurrence and development. This project plans to induce rat IBD and the IL10 gene flaw from the hairstyle IBD mouse model with TNBS, and the track the colon pathological change, the colon microcirculation function, the Rho enzyme expression relevance and the Rho enzyme inhibitors intervention effect. After that, according to the results, the relevance between Rho enzyme and the IBD is going to be discussed. Finally, Rho activating enzyme colon specificity gene knocked-out mice are going to be constructed, to observe if this kind of mouse alleviate IBD symptom after TNBS induction. The results can provide further evidence to our hypothesis.

炎症性肠病（IBD）一直被认为与炎症及免疫紊乱相关，主要采用抗炎药治疗，但始终未摆脱有效率低的现状。因此，突破原有治疗理论限制，寻找新靶标值得探索。我们通过2万矩阵基因芯片筛选发现，同时下调Rho激酶、炎症因子的治疗效果优于仅下调炎症因子的治疗效果，提示Rho激酶可能是IBD防治的新靶标，但其相关性未见报道。Rho激酶是微循环障碍疾病的新靶标已成共识，而微循环障碍是IBD的发生机制之一也有较多报道，因此，提出假设，Rho激酶可能通过介导肠微循环功能，调控IBD的发生及发展。本项目拟通过TNBS诱导大鼠IBD和IL10基因缺陷自发型IBD小鼠模型，观察结肠病变程度与结肠微循环功能、Rho激酶表达的相关性，以及Rho激酶抑制剂干预效果，探讨Rho激酶与IBD相关性。构建Rho激酶结肠特异性基因敲除小鼠，观察该类小鼠是否可缓解TNBS诱导的IBD症状，进一步获取Rho激酶作为IBD新靶。

炎症性肠病（IBD）一直被认为与炎症及免疫紊乱相关，主要采用抗炎药治疗，但始终未摆脱有效率低的现状。因此，突破原有治疗理论限制，寻找新靶标值得探索。本项目采用TNBS诱导大鼠IBD模型，观察甘草酸二铵、5-氨基水杨酸、Rho激酶抑制剂及抗IBD经典药物联用Rho激酶抑制剂对IBD治疗作用的影响，结果可见，甘草酸二铵表现出最好的治疗作用，其机制不仅与抑制Rho激酶相关，还于减少肠道内5-HT的释放有关；Rho激酶抑制剂（法舒地尔）具有一定的IBD治疗作用，但对结肠病理损伤的改善作用不如甘草酸二铵和5-氨基水杨酸，法舒地尔与5-氨基水杨酸联用有协同作用，提示，Rho激酶在炎症性肠病发病过程中是关键因素之一，但不是唯一因素，Rho激酶可作为治疗IBD的新靶标，但需要与其他靶标联合作用，方能发挥理想的疗效。基于以上研究的发现，本课题开展了应激对炎症性肠病病程影响及不同治疗方法疗效比较研究，采用不同刺激模式，观察其对IBD大鼠结肠炎症程度，结论：（1）TNBS乙醇造模，可引起典型的溃疡性结肠炎症状，但在无刺激条件下，不引起大鼠行为异常，提示引起炎症性肠病的免疫学诱因，不会导致患者心理、精神、行为异常；（2）对炎症性肠病大鼠给予一定的压力刺激，可引起大鼠活动次数增多，血中5-HT浓度升高，从而加重结肠炎症病变，这可能与5-HT浓度增加，导致肠粘膜通常性增加有关；（3）对炎症性肠病大鼠给予过度的不可预知压力刺激，会导致大鼠出现明显的抑郁行为，反而可减少结肠炎症病变，可能与5-HT水平降低有关，提示5-HT水平有可能成为炎症性肠病新的生物标志物。.综上所述，本项目除按任务书计划完成应有的研究工作外，基于研究发现，新增了新的研究内容，并提供了2点具有科学意义的结论：1.Rho激酶是影响炎症性肠病病理变化的重要靶标之一，抑制Rho激酶的活性，可改善IBD的病理损伤，但要想发挥理想的治疗效果，需与其他作用靶标的药物联合应用；2. 发现了组织及血中的5-HT水平与病理变化程度相关，提出5-HT可作为IBD生物标志物的设想。项目从2013年1月开始，至2013年12月结题，供发表研究论文3篇，其中SCI收录2篇，EI收录1篇。