丹酚酸B（DLA）对大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤保护作用机制的研究

蛛网膜下腔出血（SAH）预后很差的原因在于早期脑损伤（EBI）和脑血管痉挛（CVS），目前研究集中于EBI。EBI是多种因素参与的综合，包括炎症，缺血，凋亡等多条通路的协同参与。而丹参在亚洲国家被广泛应用于临床，治疗心脑血管等微循环障碍的疾病，其水溶性成分之一的丹酚酸B（DLA），是其最有效的治疗活性组分，具有抗炎、抗自由基、抗凋亡、抗血栓和改善微循环等功能。国内外只有将复方丹参注射液治疗SAH后CVS的临床研究，还未见有DLA对EBI所起的作用及其机制的研究报道。DLA是否在SAH后的EBI中发挥保护作用？本课题采用颈内动脉内穿刺法制作SAH模型，一方面动态观察SAH后软脑膜微循环改变情况，检测DLA术前及术后给药对SAH后微循环的影响；另一方面检测DLA对于SAH后EBI中BBB损害的炎性因子及相关蛋白表达的变化，探讨其对于EBI的保护作用机制，为中药的临床应用提供理论及实践基础。

在体动物实验：通过免疫组化及Western Blot方法检测各组实验动物在SAH后的ICAM，iNOS,TNF-a及IL-1等各因子变化情况，证实DLA在大鼠SAH后通过抑制这些炎性因子起到抗炎的作用；各组实验动物在SAH后血脑屏障BBB后MMP-9、VEGF、CollagenⅣ及Occludin的表达及活力变化，验证DLA通过抑制这些蛋白而起到保护BBB、抑制脑水肿作用的分子机制；完成各组实验动物SAH后凋亡情况的检测，包括Bcl-2，Bax及cleaved-caspase-3等各因子的蛋白检测，证实DLA对于抑制凋亡而在EBI中起到保护作用；同时发现DLA可以明显改善神经功能学评分，但对死亡率无明显降低。相关论文在撰写修改中。.对于在体微循环观察的实验显示：在SAH后的3小时内，观察到异常的微循环：整个脑的血流量降低，红细胞流速降低，微动脉和微静脉管径及流速减少，典型的血管痉挛收缩，但大多发生于微动脉内。微静脉内出现白细胞的凝结及粘附增多，但没观察到明显的白蛋白漏出。而对于DLA的治疗作用，由于观察时间窗所致，还没观察到相应的阳性结果。对于SAH后微循环的改变，其相关论文也在撰写修改中。