猪繁殖与呼吸综合征病毒激活巨噬细胞炎性体的分子机制

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS) 是由PRRS病毒（PRRSV）引起的母猪流产和仔猪呼吸障碍为特征的传染病，是目前危害养猪业最严重的传染病之一。PRRSV主要侵害猪的肺泡巨噬细胞，可引起猪肺部严重的炎性反应。研究证明PRRSV感染可引起猪巨噬细胞多种促炎性细胞因子如IL-1β的释放。IL-1β过量释放可造成肺部严重的炎性反应和继发感染，这是导致感染猪呼吸障碍的重要原因。最近研究证实巨噬细胞IL-1β的释放受细胞内炎性体的控制。PRRSV促进巨噬细胞释放IL-1β，说明PRRSV可激活巨噬细胞的炎性体。PRRSV如何激活炎性体目前尚不清楚。为此本课题将通过构建PRRSV编码蛋白的表达载体在体外转染巨噬细胞，分析不同编码蛋白对炎性体的作用，筛选激活炎性体的编码蛋白，探讨其激活途径和激活机制。这项研究不仅对探讨PRRSV的致病机制有重要的理论意义，同时对探讨PRRS 防治的新途径有重要实践意义。

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS) 是由PRRS病毒（PRRSV）引起的母猪流产和仔猪呼吸障碍为特征的传染病，是目前危害养猪业最严重的传染病之一。PRRSV主要侵害猪的肺泡巨噬细胞，可引起猪肺部严重的炎性反应和炎性受伤。研究证明PRRSV感染可引起猪巨噬细胞多种促炎性细胞因子如IL-1β的释放。IL-1β过量释放可造成肺部严重的炎性反应和继发感染，这是导致感染猪呼吸障碍的重要原因。最近研究证实巨噬细胞IL-1β的释放受细胞内炎性体的控制。PRRSV促进巨噬细胞释放IL-1β，说明PRRSV可激活巨噬细胞的炎性体。PRRSV如何激活炎性体目前尚不清楚。本课题首先通过基因重组和反向遗传技术构建了含绿色荧光蛋白基因的PRRSV感染性克隆，然后依据PRRSV的编码蛋白的基本特性和参考其它病毒（如流感病毒）激活单核/巨噬细胞炎性体的研究结果，主要分析了PRRSV编码的，最近被证明具有离子通道性质的小囊膜蛋白E在激活细胞炎性体的作用。为研究E蛋白对巨噬细胞炎性体的激活作用，我们通过mRNA介导将E蛋白基因转染猪肺泡巨噬细胞，然后用LPS刺激转染的巨噬细胞，分析培养基IL-1β的含量，结果表明E蛋白可明显促进IL-1β释放，说明E蛋白具有激活肺泡巨噬细胞炎性体的作用。这项研究不仅对PRRSV与宿主细胞相互作用及其PRRSV的致病机制有重要的理论意义，同时对探讨PRRS 防治的新靶位有重要实践意义。