巨噬细胞极化在白塞病发病机制中作用的研究

Behçet's disease (BD) is a systemic inflammatory vasculitis of unknown etiology. The susceptible genetic factors, abnormal innate and acquired immunity play important roles in the pathogenesis of BD. Macrophages, an important component of innate immune cells, play a critical role in maintaining immunological homeostasis and host defense, while the over-activation of macrophages can also cause tissue damage. They can be functionally polarized into M1 and M2 macrophages in response to microenvironmental influences. It was reported that M1 phenotype unregulated in a herpes simplex virus (HSV)-induced BD mouse model. Our previous study found that in vitro exposure to serum from patients with BD could promote human monocyte-derived macrophages from healthy donor polarized towards the M1 phenotype, suggesting that abnormal microenvironment in vivo may result in macrophage polarization, and further promote the proliferation and differentiation of Th1 and Th17 cells, eventually lead to disease onset. This project will clarify how the BD serums affect macrophage on polarized phenotype, phagocytosis and antigen presenting function, which induce Th1 and Th17 cell proliferation and differentiation. We also explore the associated key cytokines profiles and potential molecular regulatory mechanisms leading to abnormal macrophage polarization. This study may provide new insights into the pathogenesis of BD and reveal potential new therapeutic targets for BD treatment.

白塞病（BD）是一种全身性血管炎性疾病，发病机制未明，遗传背景、天然免疫和获得性免疫异常活化均参与发病。巨噬细胞是天然免疫的关键成员，在体内外微环境影响下，可极化为M1和M2型巨噬细胞，分泌各种细胞因子，发挥生理功能，亦可造成病理性损伤。BD动物模型的M1型巨噬细胞极化显著增加，我们前期研究发现BD患者血清可刺激正常单核源性巨噬细胞极化为M1型，提示BD可能存在体内微环境异常，导致巨噬细胞异常极化，并进一步促进Th1和Th17细胞增殖分化，最终导致发病。本研究拟系统鉴定BD患者血清刺激巨噬细胞的极化表型，吞噬和抗原提呈功能，及对Th1和Th17细胞增殖分化的作用；比较BD和正常人血清细胞因子谱，探索导致异常极化的相关细胞因子，以及极化相关分子调控机制。研究结果可为揭示BD发病机制提供新线索，并为探索新型治疗靶点提供理论依据。

白塞病（BD）是一种病因未明的全身性血管炎性疾病。天然免疫异常是BD发病机制中的重要因素，巨噬细胞是天然免疫的关键成员，在体内外微环境影响下，可极化为M1和M2型巨噬细胞，分泌各种细胞因子，发挥生理功能，亦可造成病理性损伤。本研究旨在揭示初治活动BD患者血清对巨噬细胞极化表型和功能的影响，及其相关分子调控机制，以期为揭示BD发病机制提供新线索。 . 针对该关键问题，本课题采用初治活动BD或者健康人血清诱导巨噬细胞极化并根据标准分型的表面标记（CD86、CD163和CD206）和分泌细胞因子（TNF-α、IL12）鉴定其表型；进一步探究BD血清诱导的巨噬细胞极化的功能改变，包括检测不同巨噬细胞分型的吞噬功能，以及通过巨噬细胞与Naïve CD4＋T细胞共培养，检测胞内细胞因子IFNγ、IL17A和核内转录因子T-bet的表达，以测定不同巨噬细胞分型对Th1/17分化的影响；最后通过检测BD血清刺激巨噬细胞不同时间后（p/T）JAK1、(p/T)STAT1、（p/T）NF-κBp65的蛋白水平，以及利用RNAseq技术比较了不同极化巨噬细胞内差异表达的有关基因，初步探索了巨噬细胞极化的分子机制。. 研究发现，与M0巨噬细胞相比，初治活动BD血清可诱导的巨噬细胞分化为M1样巨噬细胞，表现为CD86表达增高，CD163表达降低，培养上清液中细胞因子IL12、TNF-α水平增高，而HC血清诱导巨噬细胞符合M0巨噬细胞。此外，与M0巨噬细胞相比，M1型巨噬细胞和BD血清诱导的巨噬细胞的吞噬功能均显著增强，该极化类型的巨噬细胞与Naïve CD4+ T细胞共培养后T细胞内IFNγ和T-bet水平增高，而IL-17A水平无明显差异。研究还发现，LPS/IFNγ和BD血清刺激巨噬细胞后，JAK1、STAT1、NF-κBp65蛋白磷酸化水平均增加。相较HC血清诱导的巨噬细胞，BD血清诱导的巨噬细胞内共有37个差异表达的基因，其中25个基因表达上调，12个基因表达下调。. 本研究的结果提示初治活动BD血清刺激巨噬细胞可能通过激活JAK-STAT通路和NF-κB通路诱导产生M1样巨噬细胞，并增强巨噬细胞吞噬功能，诱导T细胞向Th1为主的细胞增殖分化。研究结果为揭示BD发病机制和探索治疗新靶点提供了新线索。.