HA信号途径调节肾小管上皮细胞粘附性在尿石形成中作用的研究

新生草酸钙晶体在肾脏中的滞留是肾结石形成和发展的始动因素和关键步骤。正常情况下，肾小管中尿流较快，肾小管细胞本身并不具备粘附性，无法使新生的草酸钙晶体滞留并生长为结石，只有当某些因素使肾小管细胞表面性质发生改变，草酸钙晶体才能由于粘附作用而滞留于管腔，进而形成结石。最新研究证实透明质酸（HA）是肾小管细胞表面的一类重要的晶体结合分子，但HA对肾小管上皮细胞粘附性的调控机制尚不清楚。本研究拟采用多种减少或增加HA及其受体CD44表达的技术，分别在结石患者肾组织样本、人类肾小管上皮细胞、结石动物模型等多水平，系统研究HA调节肾小管上皮细胞粘附性的分子机制及其在尿石形成中的作用，对粘附分子HA在草酸钙晶体与肾小管细胞粘附过程中的信号调控功能进行鉴定，为进一步阐明尿石症的发病机制和探索尿石形成起始环节的干预策略提供依据。

受青年科学基金资助的项目《HA信号途径调节肾小管上皮细胞粘附性在尿石形成中作用的研究》，旨在探索在草酸钙结石的形成过程中，通过草酸盐与肾小管上皮细胞的相互作用，HA、HAS、CD44表达的变化以及对肾小管上皮细胞的粘附性的影响。并通过组织标本、体外实验以及动物实验探索肾小管上皮细胞在高草酸环境下HA、HAS和CD44的表达，及其信号通路。我们通过应用草酸盐刺激肾小管上皮细胞，HA、HAS、CD44的表达均增加，信号通路p38 MAPK和JNK被激活。并完成细胞毒性检测，发现草酸盐晶体对肾小管上皮细胞可产生毒性作用。已完成人肾脏组织标本HA、HAS、CD44的检测，发现在结石患者的肾脏标本切片中，HA、HAS以及CD44的表达均高于非结石对照组。完成HAS1 siRNA的构建，并通过RNA干扰技术干扰HA表达使肾小管上皮细胞的粘附性下降。我们通过结石模型动物的建立，应用HAS抑制剂后，发现模型动物的成石速度减缓。证实了课题猜想，基本完成课题实验计划，为今后的进一步研究奠定了基础，并为尿石症的病因研究提供了新的思路和线索。