新的核膜定位分子TRAF3IP3促进细胞增殖的机制研究及其在血液系统细胞中的功能探索

TRAF3IP3（TRAF3 interacting protein 3）是我们首次证实定位于细胞核膜，并且能够促进细胞增殖的一个分子。我们的前期研究结果表明，其在293T、Hela细胞内的超表达能够促进细胞增殖并激活JNK通路。多个数据库显示TRAF3IP3主要在血液、免疫系统和细胞、某些白血病细胞系（HL60，Ramos）中表达。本课题将通过细胞水平的体外实验，研究TRAF3IP3的核膜定位对细胞增殖和激活JNK通路的具体调控机制，TRAF3IP3在血液系统细胞系中的功能；对Traf3ip3基因（人TRAF3IP3的同源基因）敲除小鼠进行研究，除了分析小鼠胚胎至成体发育过程中各组织器官一般表型，还要重点分析其对造血、血液及免疫系统细胞发育、分化、成熟的作用，及在白血病诱导发生过程中的作用等。本研究结果将阐明TRAF3IP3的生理功能和机制，并有可能揭示该分子是否参与白血病的发生发展。

TRAF3IP3（TRAF3 interacting protein 3）是我们首次证实定位于细胞核膜，并且能够促进细胞增殖的一个分子。前期研究结果表明，其在293T、Hela细胞内的超表达能够促进细胞增殖并激活JNK通路。多个数据库显示TRAF3IP3主要在血液、免疫系统和细胞、某些白血病细胞系（HL60，Ramos）中表达。本课题构建了Traf3ip3基因敲除小鼠，发现该基因在T、B淋巴细胞发育和功能成熟过程中有重要的作用。具体结果是：Traf3ip3基因敲除小鼠外周血白细胞、淋巴细胞和中性粒细胞计数减少；红细胞数、血红蛋白和红细胞压积增高；小鼠骨髓淋系共同祖细胞（CLPs）数量明显下降，而共同髓系祖细胞（CMPs）、粒单系祖细胞（GMPs）和巨核红系祖细胞（MEPs）数量均未见异常。T细胞发育受阻，Traf3ip3敲除小鼠胸腺中DP细胞比例增高，CD4 SP和CD8 SP细胞比例减少；Traf3ip3基因敲除小鼠胸腺细胞总数无差异，但CD4 SP和CD8 SP细胞绝对数明显减少。Traf3ip3调控外周免疫器官中T细胞稳态，敲除后脾脏CD4+ T效应型和中央型记忆细胞数量显著增加。而CD8+ T细胞的初始T细胞减少，效应型和中央型记忆T细胞数量显著增加；淋巴结中CD4+记忆T细胞和CD8+记忆T细胞数量增加。Traf3ip3缺失的CD4+ T细胞的体外增殖能力减弱，而CD8+ T细胞的体外增殖能力与野生鼠相比未见差异。Traf3ip3缺失细胞的凋亡水平未见差异。基因敲除小鼠B细胞发育受阻，骨髓B祖细胞、前B细胞、未成熟B细胞和成熟B细胞数量均减少；脾脏中T1 B细胞和MZ B细胞数量减少；外周血B和脾脏MZ B细胞的凋亡水平增高。敲除小鼠天然抗体减少，MZ B细胞介导的TI-II的抗体免疫应答减弱，FO B细胞的介导的TD抗体免疫应答未见差异。在正常培养的细胞中过表达Traf3ip3引起细胞自噬水平增强，且依赖于与ATG16L1结合基序；Traf3ip3基因敲除小鼠白细胞和MZ B细胞自噬水平降低。综上结果，我们认为Traf3ip3对小鼠淋巴细胞的发育和功能至关重要，Traf3ip3是一个新发现的免疫系统特有的自噬相关分子。由于T、B淋巴细胞正常有序的分化发育和功能成熟是适应性免疫应答的物质基础，本研究结果将为进一步揭示机体免疫应答机制提供新线索。