RNA干扰关键技术-基于小分子调控的shRNA构建

RNA干扰(RNAi)是本世纪生命科学的重大发现，其本质是利用小双链RNA分子特异性地降解与其序列同源的mRNA，于2006年荣获NOBEL奖。RNA干扰作为一项新颖的生物技术，不仅可广泛应用于功能基因组和药物靶点的研究，而且还可直接作为药物治疗人类的疾病。本研究以全方位解析人类基因组的功能为主攻方向，以已有的RNA干扰积累为先导，集中解决其关键技术-基於小分子调控的shRNA表达系统的构建，为后续的能产生重大科学和经济效益的RNA干扰生物平台寻找突破口。重点利用TetR蛋白和TetO DNA的特异性结合，通过高表达TetR来增强TetR/TetO的亲和力，从而大大降低shRNA在非诱导状态下的表达水平(Leakiness)，然后通过小分子四环素(Tetracycline)，诱导TetR/TetO的分离，激活shRNA的表达系统，抑制靶基因的生物功能。