δ-阿片受体—GSK-3—NMDA受体运输（trafficking）在瑞芬太尼引发痛觉过敏中的机制研究

瑞芬太尼引发的痛觉过敏临床常见，目前尚无可靠治疗方法。前期工作已证实NMDA受体系统可塑性的改变是慢性吗啡耐受发生机制中的关键环节。由于阿片类药物慢性耐受与痛觉过敏在发生机制上的相似，因此本研究制作在体SD大鼠瑞芬太尼痛觉过敏模型，利用机械性痛阈测定、放射自显影、Real Time PCR、western blot技术，完成δ-阿片受体激活状态、GSK-3磷酸化水平及NMDA受体trafficking现象的检测；并采用大鼠离体脊髓切片培养，应用δ-阿片受体拮抗剂和激动剂、GSK-3抑制剂来探讨δ-阿片受体、GSK-3 在瑞芬太尼引发痛觉过敏中的作用及两者的上下游调控机制，从而为临床合理有效地预防和治疗瑞芬太尼引发的痛觉过敏提供新的思路。

背景 瑞芬太尼是超短效的μ-阿片受体激动剂,广泛应用于全身麻醉的镇痛，据文献报告其产生痛觉过敏的发生率明显高于其他阿片类药物。研究表明δ-阿片受体和NMDA受体功能的改变在瑞芬太尼痛觉过敏的形成过程中发挥了重要的作用。GSK-3β影响突触可塑性，并对NMDA受体运输有重要调控作用。目前尚无关于δ-阿片受体、GSK-3β和NMDA受体亚单位运输与瑞芬太尼痛觉过敏机制关系尚未见国内外研究报道。.主要内容 本研究制作在体SD大鼠切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏模型，利用热板、Von Frey Filament、Real Time PCR、western blot、免疫荧光、免疫电镜技术，完成δ-阿片受体激活状态、GSK-3β磷酸化水平及NMDA受体trafficking现象的检测；并采用全细胞膜片钳技术，应用δ-阿片受体拮抗剂和激动剂、GSK-3β抑制剂来探讨大鼠脊髓背角的δ-阿片受体、GSK-3β 在瑞芬太尼引发痛觉过敏中的作用及两者的上下游调控机制。.重要结果 研究发现术中应用瑞芬太尼麻醉可加重切口痛导致的痛觉过敏；在切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏的大鼠脊髓δ-阿片受体mRNA和δ-阿片受体蛋白表达升高，GSK-3β mRNA和GSK-3β蛋白表达升高，NMDA受体NR1及NR2B亚单位蛋白表达升高且从胞浆内向细胞膜的运输增加；GSK-3β活性的改变可调节切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓NR1及NR2B亚基从胞浆内向胞膜上的转运，并且也参与调控NMDA受体介导的电流强度；δ-阿片受体的激活可调控切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓GSK-3β mRNA和GSK-3β蛋白表达水平，并且也参与调控NMDA受体介导的电流强度。研究证实瑞芬太尼可通过增加GSK-3β活性和δ-阿片受体的激活调控NMDA受体的蛋白表达和电生理功能的增强，并且δ-阿片受体的激活可调控GSK-3β的活性。.科学意义 研究发现瑞芬太尼的痛觉过敏可能是通过δ-阿片受体—GSK-3β—NMDA受体通路产生痛觉过敏现象，由于给予NMDA受体抑制剂可影响患者的正常生理功能，而给予NMDAR上游信号分子的抑制剂则能预防和逆转瑞芬太尼诱发的痛觉过敏的发生，且不影响正常的NMDAR的生理功能。这为临床合理有效地预防和治疗瑞芬太尼引发的痛觉过敏提供新的理论依据。