不同地域茯砖茶发花微生物群落结构及其品质作用的机制

Fu Brick Tea originally was a tea sold to the northern-west areas, because the unique health care effect, which recently be sold to the internal market greatly, and the manufacturers are increasing. The quality formation of Fu Brick Tea with the microorganism relations is close, the superiority fungus - Eurotium. cristatum form the golden yellow cleistothecium, the quality and quantity of them are the standards for judging the quality fit and unfit of Fu Brick Tea.The existing researches discover the differences of Fu Brick Tea microorganism composition and the Eurotium. cristatum, as a result of the experimental design and the samples gotten, the research results still could not explain the mechanism of the microflora structure of the different Fu Brick Tea’s samples and its quality function. This project is going to separate and purify the microorganisms by using the microorganism technology, to analyse the microflora structure by using the DGGE technology, to identify the microorganisms in the Fu Brick Tea and the blood relationship analysis by using the PCR-RAPD technology, to study the Eurotium. cristatum characteristics by using microorganism technology, to analyse the characteristics of enzymes protein produced by Eurotium. cristatum with the SDS-PAGE technology, to analyse Fu Brick Tea quality by applying modern chemical analysis method, and analyse the Eurotium. cristatum function by allpling it on tea materils, in order to study the mechanism of the microflora structure of the different region Fu Brick Teas and its quality function, which has the vital significance for providing the scientific basis to the production of different region Fu Brick Tea and to the formulation of technical parameters, for realizing the quality stability of Fu Brick Tea products, the national unity and social harmony.

茯砖茶原为边销茶，由于独特保健功效，近来内销市场巨大，生产厂家增加。茯砖茶品质形成与微生物关系密切，优势菌—冠突散囊菌产生的金黄色闭囊壳“金花”的质量和数量是判断茯砖茶品质优劣的标准。现有研究发现不同茯砖茶的微生物组成和冠突散囊菌存在差异，由于试验设计和样本的问题，研究成果尚不能解释样本微生物差异与其品质形成的内在实质。本项目应用微生物技术对发花微生物分离纯化；应用DGGE技术对发花微生物群落结构研究；应用PCR-RAPD技术对发花微生物鉴定和亲缘关系分析；应用微生物技术对优势菌生物学特性研究；应用SDS-PAGE技术对优势菌主要酶进行蛋白组学研究；应用现代茶叶品质化学分析方法分析品质，并分析优势菌接种茶叶的功能效用。以研究不同地域茯砖茶发花微生物群落结构及其品质作用的机制，为茯砖茶不同地域生产、技术参数制定提供科学依据，为实现茯砖茶产品品质稳定、民族团结和社会和谐具重要意义。

茯砖茶是一种紧压黑茶，主销甘肃、新疆、西藏等边疆省、区，俗称边销茶，是少数民族日常生活中的必需品。茯砖茶的品质形成与微生物的代谢活动有密切关。.研究以最具代表性的湖南、陕西、浙江茯砖茶厂的产品为研究对象，采用相同原料不同地域和不同原料相同地域生产茯砖茶为供试茶样。应用微生物学、分子生物学、PCR技术、SDS-PAGE技术及品质化学等分析方法，主要研究不同区域茯砖茶微生物分离与鉴定；不同区域茯砖茶优势菌（冠突散囊菌）生物学特性研究；不同区域茯砖茶品质及优势菌功能差异性研究。结果如下：.1. 基于高通量测序宏基因组学方法研究不同地域茯砖茶中的发花微生物群落结构。原核微生物通过聚类总共得到128个OUT，分为9个门、16个纲、29个目、50个科、66个属、112个种。 真核微生物利用高通量测序总共得到569个OUT，分为个2门，7个纲，8个目，12个科，13个属，15个种。其中曲霉属（Aspergillus）是所有茯砖茶样中的绝对优势菌种。 .2. 鉴定了不同地域同期交叉制作的茯砖茶中的“金花”菌。结果表明：从9个茯砖茶样品中，分离获得13株“金花”菌。证明了茯砖茶中的“金花”菌存在遗传多样性。.3. 研究了不同地域加工的茯砖茶中“金花”菌的生物学特性。对13 株“金花”菌分别开展了不同碳源、氮源、温度等生物学特性研究。结果表明：不同来源的“金花”菌在不同的环境条件下，形态特征有区别，遗传上呈现出多样性。.4. 基于shotgun技术的宏蛋白质组学方法研究了不同地域的茯砖茶中微生物酶系。分别从湖南和浙江茯砖茶中鉴定到344和251个蛋白，包括多种水解酶、氧化酶、蛋白酶、EMP和TCA能量代谢关键酶、结合蛋白、热激蛋白及其他蛋白等。表明样品不同微生物分泌的酶系存在一定的差异。.项目通过系统地研究与分析，阐述了不同地域加工的茯砖茶产品，其品质形成的差异性及内在联系。对茯砖茶的“发花”机理和不同区域产品的差异性有了进一步的认识。