RAAV介导IGF-1基因逆向特异性转染治疗糖尿病性膀胱的实验研究

应用分子克隆技术构建重组腺相关病毒载体，应用无辅毒的质粒共转染技术获取高滴度，高质量的重组腺相关病毒颗粒，注射到膀胱壁，利用rAAV能循神经轴索逆向轴浆运输的特性，定点整合IGF-1基因至支配膀胱的神经元，局部表达IGF-1。应用定量RT-PCR，Western blot技术、电镜技术以及尿动力学技术研究转IGF-1基因治疗对糖尿病性膀胱支配神经的营养作用；对糖尿病性膀胱的轴索和突触超微病变的逆转作用；对病变膀胱的感觉和运动神经功能的恢复作用。该研究综合应用了神经生物学和病毒学的新成果以及分子克隆技术，以期获得一种有效治疗糖尿病性膀胱的全新治疗策略，从而改变目前仅能保守治疗糖尿病性膀胱而不能恢复病变功能的局面；也将为基因治疗其它糖尿病性神经病变或其它神经原性膀胱提供一种新的思路。