抗alpha-突触核蛋白单克隆抗体治疗帕金森病的实验研究

帕金森病（parkinson's disease, PD）作为最常见的神经退行性疾病之一，目前其发病病因还不完全清楚，临床也无针对病因的治疗策略，只有缓解症状的多巴胺(dopamine, DA)替代疗法，但长期使用会导致严重的并发症。本项目以前期临床大样本研究的发现为基础，试图以在PD发病过程中起关键作用的alpha-突触核蛋白（alpha-synuclein, alpha-SYN）为靶点，采用其不同形式的单克隆抗体为治疗药物，在PD细胞核动物模型研究其对DA神经细胞的保护作用，筛选出具有最强保护作用的治疗抗体组合，并初步探索其治疗机制，为后续的临床前（大动物）和临床实验奠定基础。

我们以前的临床研究发现，alpha-突触核蛋白自体抗体可能具有多巴胺能神经元保护作用。本课题的目的是在帕金森病细胞和动物模型，验证alpha-突触核蛋白抗体是否具有多巴胺能神经元保护作用以及可能的机制。我们首先制备了针对不同形式的alpha-突触核蛋白的单克隆抗体（包括野生型，磷酸化和硝基化的alpha-突触核蛋白）。在原代培养的大鼠中脑神经元和SH-SY5Y多巴胺能神经细胞系，以不同组合和不同浓度的抗体干预alpha-突触核蛋白聚集体对神经细胞的损伤过程。我们的结果发现，抗体干预可明显减少神经元对alpha-突触核蛋白聚集体的摄取，增加神经细胞内的alpha-突触核蛋白聚集体降解和减少神经元本身磷酸化alpha-突触核蛋白的产生。不同抗体保护作用的比较发现，野生型抗体具有最好的多巴胺能神经元保护作用。帕金森病动物模型（采用纹状体立体定位注射alpha-突触核蛋白聚集体的方法）的研究发现，抗体干预可明显减少模型动物中脑磷酸化alpha-突触核蛋白免疫阳性神经细胞数，增加黑质多巴胺能神经元数目和改善动物的运动功能。当前最新的研究表明，帕金森病的发病和进展，可能是由于病理形式的alpha-突触核蛋白在脑内以一种类似于朊蛋白的方式传播而导致的。我们的研究证实，alpha-突触核蛋白可以干预病理性alpha-突触核蛋白的整个传播或代谢过程（包括摄取、降解和对细胞的损伤）。alpha-突触核蛋白抗体干预可能是帕金森病神经元保护治疗的重要手段。