软坚散结中药抑制肿瘤相关成纤维细胞研究

中医学认为软坚散结中药能使结聚等有形肿物软化后逐渐消散。受国家自然科学基金资助，我们的研究发现：硫酸多糖与硫酸糖肽通过抑制成纤维细胞生长因子（bFGF）而抑制肿瘤血管生成，导致肿瘤液化坏死，是软坚散结中药促使肿瘤"软化"的重要机制。肿瘤硬度增加与间质中肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）引起的间质纤维化有关，而bFGF是联系肿瘤血管生成与间质重建的桥梁。bFGF促使间质细胞分化为CAFs，CAFs促进肿瘤血管生成与间质重建，导致肿瘤密度增加。我们进一步提出抑制CAFs是软坚散结中药促使肿瘤软化消散的又一重要作用机制。本研究通过软坚散结中药中硫酸多糖与硫酸糖肽对成纤维细胞分化为CAFs、上皮-间质转化、间充质干细胞向CAFs转分化、肿瘤细胞-间质细胞相互作用、CAFs的功能的影响，系统研究软坚散结中药通过抑制CAFs而抑制肿瘤间质重建，导致肿瘤硬度降低而"软化、消散"的机制。

本研究从CAFs来源、CAFs的功能及肿瘤细胞-CAFs的相互作用方面研系统研究软坚散结中药通过抑制CAFs而抑制肿瘤间质重建，导致肿瘤硬度降低而“软化、消散”的机制。研究发现，bFGF能够促进BMSCs向CAFs转化。软坚散结中药守宫硫酸糖肽（Gekko Sulfated Glycopeptide, GSPP）能够通过bFGF抑制CAFs的增殖，拮抗bFGF对CAFs增殖的促进作用。GSPP抑制CAFs的迁移，同时可拮抗bFGF对CAFs迁移的促进作用。乳腺癌条件培养基促进CAFS的增殖及迁移，在加入乳腺癌条件培养基的环境下，GSPP拮抗bFGF对CAFs细胞增殖、迁移的促进作用。在CAFs条件培养基的环境下，GSPP抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移。bFGF诱导CAFs细胞bFGFmRNA表达增加，GSPP对CAFs分泌bFGF无明显影响。我们建立了乳腺癌裸鼠移植瘤模型，发现GSPP能够抑制肿瘤生长及肿瘤间质中α-SMA的表达。对夏枯草多糖的研究发现，夏枯草多糖可以抑制CAFs的增殖与迁移，抑制CAFs的bFGF mRNA及相应蛋白的表达，促进CAFs的细胞凋亡，同时减弱bFGF对CAFs的促进作用。夏枯草多糖减弱CAFs条件培养基对乳腺癌细胞的促进作用。对褐藻多糖的研究发现，褐藻对CAFs的增殖无明显抑制作用。考虑原因为对bFGF的结合能力，守宫硫酸糖肽>夏枯草硫酸多糖>褐藻多糖。