斑马鱼粒细胞发育调控基因ggf的克隆、功能和调控通路研究

粒细胞的正常产生与发育对机体的健康稳定起着十分重要的作用。尽管已知转录因子Pu.1、C/EBP1和cMYB等与此相关，但粒细胞分化与成熟的分子调控机制，目前尚未明确。.我们前期筛选到的一个斑马鱼突变体ggf-sm1，主要表型为：中性粒细胞数量正常但吞噬功能丧失，髓系、红系和淋系细胞正常；微分干涉相衬成像（DIC）显示粒细胞颗粒形态小、数量少、信号弱；突变基因初步定位在11号染色体的z4190-z3362区域，排除了已知相关基因的可能性。前期结果表明ggf是一个调控粒细胞分化成熟的新基因。.本项目拟进行ggf基因精确定位和克隆、鉴定及其在粒细胞分化命运中的细胞学功能和分子调控机制的研究。.该研究可望发现中性粒细胞特定颗粒缺陷（SGD）综合征的新的发病机制、分子诊断和治疗策略。

髓过氧化物酶（MPO）是哺乳动物血红素过氧化物酶家族成员之一，主要储存在中性粒细胞的初级颗粒中，发挥免疫作用。MPO与多种人类疾病的产生和发展都有着较为密切的关系。临床研究表明，MPO介导的氧化作用所引起的组织损伤在其他慢性炎症疾病的发展过程中发挥重要作用。本课题利用斑马鱼髓过氧化物酶突变体对其本身的功能，尤其是杀菌功能进行了研究。结果：1. 我们通过大规模筛选获得了一个苏丹黑SB染色缺失的斑马鱼突变体。2. 通过对突变体smu681进行定位克隆，发现其突变基因为mpx。3.初步表型分析显示突变体中中性粒细胞数量正常，但缺乏过氧化物酶。4. 通过对突变体进行白色念珠菌侵染实验，我们发现其侵染后胚胎的存活率与野生型相差不大，但是其内部真菌生长数量明显较多。5.进一步研究发现，突变体的侵染部位往往有更多的中性粒细胞聚集，同时相关炎症因子的表达也更为强烈，表明其炎症反应更加严重。这些发现髓过氧化物酶缺陷改变了真菌感染的免疫反应。