独活寄生汤调节PERK/Bip信号通路抑制骨性关节炎软骨细胞凋亡的机制研究

Chondrocyte apoptosis a key factor regulats the cartilage degeneration of osteoarthritis, and PERK/Bip signaling pathway plays an important role in the process of chondrocyte apoptosis. Previously, we found that Duhuo Jisheng Decoction inhibited the inflammation, chondrocyte apoptosis, and promoted chondrocyte proliferation to delay the articular cartilage degeneration of osteoarthritis, indicating that PERK/Bip signaling pathway may be a potential target of the inhibition of Duhuo Jisheng Decoction on the chondrocyte apoptosis. Therefore, animal model and cell model of osteoarthritis as research object in this study, using 7T MRI, Real time PCR, Western Blot, immunohistochemical staining observes the effect of Duhuo Jisheng Decoction on the the key regulator mRNA and protein expressions of PERK/Bip signaling pathway in osteoarthritis to explore the mechanism of Duhuo Jisheng Decoction on chondrocyte apoptosis of osteoarthritis, and provides an experimental base for revealing the scientific connotation of the clinical efficacy of Duhuojisheng Decoction.

软骨细胞凋亡是调控骨性关节炎软骨退变的核心因素，PERK/Bip信号通路在软骨细胞凋亡过程中发挥着重要作用。课题组前期研究发现，独活寄生汤抑制骨性关节炎的炎症反应、软骨细胞凋亡，促进软骨细胞增殖，延缓关节软骨退变，提示PERK/Bip信号通路可能是独活寄生汤抑制软骨细胞凋亡的重要作用途径之一。本研究以骨性关节炎的动物模型和细胞模型为研究对象，采用7T MRI、Real time PCR、Western Blot、免疫组化技术，观察独活寄生汤对骨性关节炎PERK/Bip信号通路的关键调控因子PERK、Bip、eIF2α、GADDl53、caspase-12、caspase-9、caspase-3 mRNA与蛋白表达的影响，探讨独活寄生汤抑制骨性关节炎软骨细胞凋亡的作用机制，为揭示独活寄生汤临床疗效的科学内涵提供实验基础。

独活寄生汤是治疗骨性关节炎的经方，但其作用机制尚未完全阐明。软骨细胞凋亡是骨性关节炎软骨退变的关键病理因素，PERK/Bip信号通路是调控软骨细胞凋亡的重要通路之一。因此，本研究以膝骨性关节炎的动物模型和细胞模型为研究对象，采用RT-PCR、Western Blot等方法，观察独活寄生汤对膝骨性关节炎大鼠PERK/Bip信号通路关键调节因子PERK、Bip、eIF-2α、ATF-4、GADDl53、Caspase-9、Caspase-3表达的影响，结果显示：(1)独活寄生汤可改善膝骨性关节炎大鼠的软骨形态，延缓软骨退变；增加膝骨性关节炎大鼠血清Ⅱ型胶原C前肽和软骨组织糖胺聚糖含量，降低血清Ⅱ型胶原C端肽含量，减轻软骨基质破坏；下调膝骨性关节炎大鼠软骨PERK/Bip信号通路关键调节因子PERK、Bip、eIF-2α、ATF-4、GADD153、Caspase-9、Caspase-3 mRNA与蛋白表达，抑制内质网应激反应引起的软骨细胞凋亡。(2)独活寄生汤含药血清通过下调大鼠退变软骨细胞PERK、Bip、eIF-2α、ATF-4、GADDl53 mRNA表达及降低Caspase-9、Caspase-3活性，下调PERK、Bip、eIF-2α、ATF-4、GADDl53、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达，抑制软骨细胞凋亡。以上研究结果表明独活寄生汤可通过调控PERK/Bip信号通路，抑制软骨细胞凋亡，延缓膝骨性关节炎的病理进程，为独活寄生汤临床治疗膝骨性关节炎提供实验依据。.本课题发表学术论文8篇，其中SCI源期刊收录论文1篇。