piwil2靶向转染对自噬调控及对糖尿病肾病肾病足细胞损伤的保护作用

piwil2 is a stem cell-specific expression protein that play a central role in inhibition apoptosis level and development inflammation. Beside on previous study toward treament diabetic nephropathy with stem cell,our hypothesis that renal tissue can get stem cell fuction ,can get an ablility of self-healing,that may paly an improtant role as diabetic nephropathy treament though targeted transfection MRNA of piwil2. With the model of rat induced by streptozotocin and human podocyte, we examined the level of Beclin1,Lc3, STAT3,P53 and mTOR with westernblotting,CHIP ,RT-PCR and so on under targeted trabsfection MRNA of Piwil2.We expected that piwil2 may play an imporant role as diabetic nephropathy though inhibit apoptosis and activition autophagy thus charge the imbalance of programmed cell death.

Piwil2是特异性干细胞表达的特异性蛋白，具有抑制凋亡，影响炎症发生等多种生物学作用。本研究在以往间充质干细胞治疗糖尿病肾病研究基础上，假设通过piwil2定向转染至肾组织，使肾组织具有某些干细胞特性，可能重新具有某些自我修复潜能，从而起到对糖尿病的治疗作用。本项目采用链脲佐菌素干扰制作的糖尿病肾病动物模型，以及人足细胞模型。在细胞层面及动物层面转染Piwli2，采用间接免疫荧光，Westernblotting，CHIP，RT-PCR等分子生物学技术，观察Beclin1、LC3，STAT3，P53、mTOR等蛋白的表达。预期转染piwli2可以通过抑制细胞凋亡，促进细胞自噬发生，改变原有的糖尿病肾病中细胞程序性死亡失衡，而对糖尿病肾病起到治疗作用。

糖尿病肾病（diabetic nephropathy）是导致终末期肾脏疾病的重要原因之一，足细胞及肾脏固有细胞细胞程序性死亡（programmed cell death）是其基本特征。足细胞是肾脏重要的终末细胞，抗凋亡能力差，本课题希望通过转染Piwil2这一重要的原始干细胞基因，使足细胞具有某些干细胞特性，能抵抗高糖环境下细胞病理性凋亡及PCD异常。本课题主要研究成果包括以下几个方面：（1）我们的研究结果发现在体内转染Piwil2，可以改善减轻大鼠蛋白尿水平，改善DN特征性损伤，保护足细胞；(2) 我们发现某些中药复方制剂能够通过改善PCD相关通路异常而对DN起到治疗作用，其机制可能与ROCK1通路相关；(3) MST1 是本研究发现的另一个重要的Piwil2调控的下游蛋白。我们在体内、体外实验都观察到高糖环境下MST1的高表达，通过抑制MST1过度激活可以改善DN大鼠肾脏损伤，抑制凋亡蛋白酶表达，其机制可能与抑制Fas/FasL信号通路等相关。本项目团队通过基金直接或间接资助发表论文6篇，其中SCI论文2篇，核心期刊论文2篇，另有一篇SCI论文接收。