用抗病毒病的工程抗体基因,探讨新的植物抗病育种途径为目的。从抗BNYVV的单抗杂交瘤的总DNA中,扩增了重、轻链可变区基因,通过中间载体将其连接成SCFV基因,建成细菌分泌型和非分泌型表达载体;切下SCFV序列,加入适当的人2合成序列后,再插入到经修饰的PEBT10和PBch质粒中,建成分别含35S,双25S启动子和信号肽的植物载体:pZBNV1,V2和V3。并分别转入农杆菌中。取pZBNV1转化烟草,细菌载体转化细菌,都获得表达。ELISA法测活显示有同该病毒抗原结合的活必性。证明细菌和植物体内有正确装配,折叠SCFV的能力,可进一步做抗病育种的研究。甜菜转化系统已建立,用pZBNV1转化获得了小苗,正进一步筛选,以结果同国外报导一致,进展接近。
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数据更新时间:2023-05-31
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