甲醛对基因组DNA甲基化干扰及其在细胞恶性转变中的作用

本研究拟以人支气管上皮细胞16HBE、及其DNMT1基因缺陷细胞株为研究对象，采用近期发展起来的染色质免疫沉淀（CHIP）、定量甲基化特异性PCR（Q-MSP）、高效毛细管电泳（HPCE）等检测基因组及特定基因表遗传模式的方法，结合real-time PCR、免疫印迹等分子生物学方法，探讨甲醛对人体外培养细胞全基因组甲基化状态的影响，并选择DNA修复酶基因MGMT、抑癌基因P16等作为靶基因，研究甲醛对其启动子区甲基化模式的作用，及其引发的下游效应，同时对在DNA甲基化过程中发挥重要作用的DNMT1、MeCP2等基因的表达改变进行监测，观察以上事件发生的时空关联，提出甲醛致癌可能的表遗传机制，并通过比较DNMT1基因缺陷细胞株与原细胞株之间对甲醛毒性反应的差异，明确DNMT1在其中所扮演的角色，为全面评价甲醛毒性提供依据，也为建立起更加快速、灵敏、高效的安全性评价方法提供新思路。