酒依赖同胞对及核心家系表观遗传及随访研究

全球4亿多人过度饮酒，酒依赖患者1.4亿，严重影响个体身心健康、家庭幸福和社会安定，成为严重全球公共卫生问题。酒依赖由遗传与环境因素共同作用所致。目前有关酒依赖经典遗传学研究较多，但难以反映环境因素影响。而环境因素可通过表观遗传修饰机制起作用。故我们假设酒依赖的形成除经典遗传学改变外，酒使用及环境因素导致的表观遗传修饰变化也可能是重要机制之一。本研究通过临床访谈收集酒依赖患者、同胞、健康对照及其核心家系（先证者及其亲/子代）临床资料和血标本，采用DNA甲基化芯片、焦磷酸测序技术、组蛋白乙酰化芯片和染色质免疫共沉淀等技术，检测相关候选基因DNA甲基化、组蛋白乙酰化状态。通过酒依赖和对照组研究，分析酒依赖中存在的表观修饰改变；通过酒依赖同胞对随访研究，分析酒依赖发生过程中的表观修饰动态演变；通过核心家系分析上下代之间是否存在表观遗传变化。揭示表观修饰和遗传在酒精使用障碍病理机制中的作用。

全球4亿人过度饮酒，酒依赖患者1.4亿，严重影响个体身心健康、家庭幸福和社会安定，酒依赖已经成为全球严重公共卫生问题。酒依赖是遗传因素与环境因素共同作用所致。目前有关酒依赖经典遗传学研究较多，但难以反映环境因素影响。而环境因素主要通过表观遗传修饰机制起作用。故本研究将酒依赖及环境因素导致的表观遗传修饰变化作为主要研究内容。本研究共收集酒依赖及未患病同胞对10对，酒依赖及健康对照各100例，酒依赖核心家系90个。并采用SCID-I/P中文版、AUDIT量表、生活事件量表（LES）、Wheatley应激量表、第5版成瘾严重度指数分别进行访谈和评定。通过对10对酒依赖及其未患病同胞对DNA甲基化芯片扫描，分析发现在两组之间存在1581个差异性甲基化位点，并对这些差异性位点进行生物学通路分析。这些差异性位点参与13条生物学过程，19条分子功能及20条分子结构组成，33个差异性基因参与代谢通路。利用焦磷酸测序技术，对基因ALDH1L2,GAD1,DBH及GABRP位点进行DNA甲基化芯片验证，两者之间具有较好相关性（R2依次为：0.870,0.977,0.993,0.998）。采用染色质免疫沉淀法（ChIP）分别检测100例酒依赖组和健康对照组外周血HTR3A、GABRA1基因和管家基因gapdh启动子区组蛋白H3K9乙酰化水平，发现酒依赖组外周血HTR3A、GABRA1mRNA基因启动子区组蛋白H3K9乙酰化升高。利用RT-PCR分析外周血HTR3A、GABRA1基因和管家基因gapdh基因的表达情况，发现与健康对照组相比，酒依赖组HTR3A、GABRA1基因mRNA表达水平均升高。通过甲基化位点及乙酰化位点的研究，揭示DNA甲基化变化及组蛋白乙酰化升高可能在酒精使用障碍病理机制中起到一定作用。这有助于更好地理解“环境-基因”在酒依赖神经生物学方面的影响，也为以后的积极治疗提供了更多的参考依据。