鲆鲽鱼类原始生殖细胞和精原细胞识别的分子基础及其分离和鉴定

鱼类是重要的研究模型，也是人类重要的蛋白质来源，濒危鱼类的遗传资源需保护，水产优良品种的种质需长期保存，建立鱼类完整遗传信息长期稳定的保存方法意义重大。但鱼类卵子和胚胎体积大、卵黄多，难以冷冻保存，鱼类精子可以冷冻保存，但单纯精子保存无法实现物种遗传资源的全面保存与恢复。原生殖细胞（PGCs）和精原细胞（SSCs）是能够将遗传物质传递给子代的细胞，有高度的两性分化能力，且细胞小、胞质少，易进行冷冻保存，是种质资源保存的理想细胞类型。本课题研究PGCs和SSCs识别、分离和鉴定的分子基础，克隆鲆鲽鱼类PGCs和SSCs特异表达的基因，分析基因结构和表达特征，获启动子序列并和绿色荧光蛋白基因结合构建生殖质细胞特异的表达载体，分别通过显微注射和细胞转化方式标记和识别PGCs和SSCs，然后分离纯化这些可视化的细胞，为利用PGCs和SSCs细胞开展鱼类优良品种和濒危物种的种质保存和利用奠定基础。

鱼类是原始的脊椎动物，也是重要的研究模型，建立鱼类生殖系干细胞的识别、示踪和分离方法意义重大。本研究以鱼类原生殖细胞（PGCs）和精原细胞（SSCs）识别、分离和鉴定的分子基础为主要目标，克隆了鱼类PGCs和SSCs特异表达的vasa，nanog，oct4，dazl，sox2；Ddx3，p68等基因，分析了其结构特征和表达特征，获得了启动调控序列信息，并构建了鲆鲽鱼类PGCs和SSCs的示踪识别载体和转基因载体多个，通过注射和转染成功地识别了胚胎和仔鱼的PGCs以及成鱼的SSCs；将示踪并成功筛选分离的PGCs和SSCs细胞进行了胚胎移植、仔鱼移植实验，获得了能够孵化的生殖细胞嵌合体仔鱼。为利用PGCs和SSCs细胞开展鱼类优良品种和濒危物种的种质保存和利用奠定基础。相应研究成果共发表SCI论文5篇。