分化抑制因子Id1在子宫颈癌发生中的作用和机理研究

子宫颈癌是影响妇女健康的重大疾病，HPV感染是主要病因，但其发病的分子机理不清楚。虽然在多种肿瘤组织中过量表达，分化抑制因子Id1在肿瘤发生中的作用未阐明，而其在宫颈癌的作用及机理未见报道。我们前期工作显示，Id1在宫颈癌组织高水平表达，并与肿瘤进展和转移相关。但Id1在宫颈的具体致癌机制，尤其是与HPV感染的关系亟需阐明。我们推测：HPV与其它致癌因子通过协同促进Id1的表达，激活与细胞存活和凋亡密切相关的NF-κB途径，从而促进宫颈上皮的恶性转化。为此，本项目将：①采用致癌物诱导人永生化宫颈细胞体外转化，探明Id1在宫颈癌发生中的作用；②探明Id1是否通过激活NF-κB途径参与宫颈癌的发生；③探明宫颈癌发生过程中HPV及致癌剂对Id1表达的影响。本课题首次系统研究Id1在宫颈癌发病中的作用及分子机理，研究结果可能为阐明宫颈癌的发病机制提供实验依据，并发现宫颈癌发病的新的关键分子。

课题组经过3年的研究，圆满完成了《分化抑制因子Id1在子宫颈癌发生中的作用和机理研究》（编号：81001158）。主要研究成果包括：.1. 经NPYR诱导的人宫颈上皮永生化H8细胞，能够形成软琼脂克隆，并在裸鼠体内成瘤，证明NPYR能够成功诱导H8细胞体外转化模型的建立。.2. H8细胞经NPYR转化后，Id-1的表达，不论在蛋白水平或是mRNA水平，均有明显升高，证明Id-1与人宫颈上皮细胞的转化有相关性。.3. Id-1过表达的H8细胞经NPYR转化后，其软琼脂集落形成能力和裸鼠成瘤能力均增加，证明Id-1上调能够促进NPYR诱导的H8细胞转化过程。.4. Id-1干扰后的H8细胞经NPYR转化后，其软琼脂集落形成能力和裸鼠成瘤能力均受到抑制，证明Id-1下调对NPYR诱导的H8细胞转化有抑制作用。.5. Id-1过表达的H8 细胞核蛋白中NF-κB p65和p50亚基的表达均增加，并且荧光素酶检测法检测NF-κB的核转录活性增强，提示Id-1可能通过激活 NF-κB参与子宫颈上皮细胞的转化过程。.6. IκBα突变基因慢病毒载体转染Id-1过表达H8细胞株后，具有表达外源性IκBα突变体蛋白的能力，并且荧光素酶检测NF-κB的转录活性下降，提示外源性IκBα突变体基因的表达可以有效阻断NF-κB的激活，抑制NF-κB的核转录活性。.7. IκBα突变体基因阻断NF-κB活性后，能抑制Id-1介导的细胞转化能力，强烈提示NF-κB参与Id-1促进NPYR诱导的子宫颈上皮细胞的转化过程。.8. 体外及体内研究均表明，Id-1的激活与HPV感染，尤其是HPV16感染有关，提示Id-1可能是HPV致癌机制的下游通路。. 课题组的研究已经发表了两篇文章，其中一篇发表在Int J Gynecol Cancer上，影响因子1.7，另一篇发表在核心期刊《现代妇产科进展》上；该课题培养1名博士研究生，2名硕士研究生。