ICOS通路障碍介导的循环型滤泡辅助性T细胞分泌IL-21水平降低在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的作用研究

The metastasis and progression of diffuse large B cell lymphoma (DLBCL) is correlated with low function of CD8+ T cells. Interleukin 21 (IL-21) plays a key role in CD8+ T cells, whereas circulating follicular helper T cell (CTfh) is a major source of producing IL-21. Our data have shown increased proportion of CTfh as well as decreased level of IL-21 in DLBCL. We hypothesize that deregulation of CTfh in DLBCL causes low level of IL-21, and results in low function of CD8+ T cells, which eventually aggravates the cancer.The possible pathway is through ICOS. In the current study, we will investigate the maturation and activation of CTfh in patients and healthy controls by using flow cytometry; we will test the function of CTfh in DLBCL through in vitro experiments; and we will test the effect of ICOS/ICOSL and c-Maf on the regulation of CTfh using western blot; we will also test effect of CTfh and IL-21 on DLBCL in mice model. This research will have an impact on understanding the pathogenesis of DLBCL.

弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）的转移复发与CD8+T细胞功能低下相关，而白介素21（IL-21）是激活CD8+T细胞的重要因子,循环型滤泡辅助T细胞（CTfh）可大量分泌IL-21。我们前期研究发现，DLBCL患者CTfh数量异常增加而IL-21水平下降，且与病情严重程度相关。推测DLBCL患者CTfh功能紊乱，导致IL-21分泌降低，引发CD8+T细胞效能减弱。我们推断ICOS信号通路障碍可能是CTfh失调的根源。本项目拟采用流式细胞技术分析DLBCL患者CTfh成熟活化程度以及分泌IL-21的能力，通过蛋白质印迹检测CTfh的功能变化，通过刺激与阻断ICOS信号通路及检测下游c-Maf活化情况，探明DLBCL患者CTfh分泌IL-21的调节机制，并通过实验动物模型探索CTfh和IL-21对DLBCL的治疗作用。本项目将从崭新角度揭示DLBCL的免疫逃避机理。

弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）是成人淋巴瘤最常见的一种类型，恶性程度高。治疗后约30%的患者会复发，且复发后的DLBCL患者预后极差，尚无有效治疗方法。因此，研究DLBCL发病的机制并提供有效的预防复发方案成为临床亟待解决的重要问题。本课题探讨了滤泡辅助性T细胞在DLBCL中的作用机制。研究结果显示，循环型滤泡辅助性T细胞可以有效促进DLBCL细胞的生存与增殖，且循环型滤泡辅助T性细胞的IL-21表达下降并显现出较弱的细胞毒性作用。进一步研究滤泡辅助性T细胞的亚型发现，DLBCL 患者组循环型滤泡调节性T细胞的比例较健康组升高，且复发患者肿瘤组织中滤泡调节性T细胞水平更高。功能检测表明，滤泡调节性T细胞能调节自体T细胞的免疫抑制作用。机制研究显示，DLBCL患者体内滤泡辅助性T细胞的ICOS通路受损，且滤泡调节性T细胞亚群和CD25-滤泡辅助性T细胞亚组均表现出比CXCR5-CD4+T细胞显著更高的Bcl-6表达，而CD25-滤泡辅助性T细胞显示出比滤泡调节性T细胞显著更高的IL-21转录状态。动物实验结果显示，小鼠滤泡辅助T细胞的数量上升，且促进肿瘤细胞增殖。本课题的研究成果揭示了滤泡辅助性T细胞在DLBCL发生发展中的作用及分子机制。项目成果对于研发DLBCL的新型临床治疗方法提供有力依据。