天竺桂多酚类化学成分和降糖活性研究

包括美国农业部所属Beltsville研究中心在内的多家研究结果表明，肉桂多酚具有明显的降血糖作用，可能与其多酚类成分增强胰岛素活性有关，引起了人们的广泛注意。但由于国外药理试验所使用的肉桂品种较为混乱，实验结果不一致甚至相互矛盾，影响了肉桂多酚的开发利用。我们利用国内肉桂品种较多的资源优势，综合运用多种分离提取及活性评价技术，已经观察到了天竺桂多酚的体外胰岛素增敏作用，并鉴定出天竺桂提取物是体内试验降血糖作用最强的肉桂品种，相关的研究结果已申请专利并在国际学术刊物上发表。本申请课题将在前期工作的基础上，综合运用丙酮-水提取，大孔树脂、琼脂糖、葡聚糖凝胶层析，以及HSCCC和反相硅胶纯化等多种提取分离方法，进一步对天竺桂多酚提取物进行更加系统的分离，系统地阐明天竺桂降血糖活性的物质基础及机制，为开发基于天竺桂的抗糖尿病药物打下基础,为多酚类化学成分的研究提供方法学的积累。

糖尿病是严重威胁人类健康的世界性疾病，给社会和经济带来了沉重的负担。为了研究中药天竺桂中多酚的降糖活性，在前期实验的基础上本课题开展了天竺桂多酚的提取分离条件优化、多酚单体成分的分离和结构鉴定、富含天竺桂多酚提取物的小鼠体内降糖活性实验和可能的降糖机制研究等。在综合应用多种色谱分离方法分离出单体多酚后，运用质谱、核磁共振以及苄硫醇化学衍生化的方法确定了多酚的结构和结构类型；利用噻唑蓝测定细胞活力法评价了天竺桂多酚提取物对棕榈酸或过氧化氢损伤的INS-1细胞的保护作用，并进一步利用db/db自发Ⅱ型糖尿病小鼠观察了天竺桂提取物对糖尿病小鼠糖代谢的影响。结果显示，用优化的多酚提取工艺提取天竺桂多酚含量可达38%以上（相关研究已经申请专利）；天竺桂提取物中的多酚是儿茶素的低聚体，主要为B-型结构；天竺桂多酚能够剂量依赖地保护棕榈酸或过氧化氢诱导损伤的INS-1细胞，并且显著抑制过氧化氢引起的INS-1细胞内活性氧增加；200 mg•kg-1剂量给药4周后降低了db/db小鼠空腹血糖，改善了小鼠口服糖耐量，显著增加了胰岛素耐量。由此可见，B-型的天竺桂多酚具有一定的降糖活性，其机制可能为减少胰岛β细胞活性氧水平，抵抗氧化应激对β细胞的损伤，从而保护胰岛β细胞。本研究还发现不同品种的桂皮多酚含量和主要多酚类型不同（如柴桂多酚为A-型多酚，肉桂和天竺桂多酚为B-型多酚），降糖活性方面也存在差异，活性方面的差异可能和它们所含主要多酚类型不同有关。