牛胚胎干细胞的分离与克隆

以PMEF为饲养层，DMEM+15%NBS+0.1Mβ-巯基乙醇+0.1μMNaSeO3为基本培养基，抑制分化培养69枚牛早期胚胎和以PBMF为饲养层分离8个牛胎儿PGCs,分离克隆ES细胞。其中53枚胚胎分离克隆出类ES细胞（77%），有9枚ES细胞传6代。牛胎儿6个克隆出类ES细胞（75%），其中1个传8代。经形态观察、AKP染色、体内、体外分化实验等方法检测，具有ES细胞诸多特征。同时，对牛不同胚胎类型、胚胎质量、细胞消化液、LIF和LGF-1等因素对ES细胞克隆的影响进行了对比实验和研究。以小鼠为模型，分离克隆ES细胞（最高传9代）和牛作了有关对比研究。该研究为牛ES细胞建系积累了较多的经验和资料。研究期间发表论文7篇，完成博、硕士论文各1篇，全国性学术报告3次。