II型PI3K家族基因在斑马鱼血管和造血系统发育中的功能研究

血管和造血系统在胚胎的器官发育及成体的多种疾病发生过程中发挥重要的生理功能。I型PI3K信号通路参与调节血管和造血系统的发育，但II型PI3K的体内生物学功能未见报道。在斑马鱼中，我们发现II型PI3K基因家族成员PI3KC2A和PI3KC2B参与调节造血系统发育，PI3KC2A还参与调控血管新生。本项目拟利用相关细胞谱系被荧光标记的转基因斑马鱼，通过morpholino介导的基因敲降、原位杂交、野生型及突变体mRNA挽救等方法，在详尽解析基因敲降导致的胚胎发育表型变化的基础上，对II型PI3K在血管和造血系统发育中的功能及其分子机制进行深入研究，寻找与功能直接相关的关键结构域，解析其在血管和造血系统发育中的上下游调控网络，为PI3K信号通路的体内生物学功能及其在血管和造血系统发育中的分子机制研究提供新的线索。

对II型PI3K基因家族成员PI3KC2A的体内生物学功能及其作用机制进行了深入研究。斑马鱼中PI3KC2A基因对于早期肝脏的发育是必需的。在肝脏出芽期，PI3KC2A的敲降导致肝祖细胞的凋亡显著增加。去泛素酶STAMBP与PI3KC2A存在相互作用。STAMBP基因的敲降与PI3KC2A的敲降产生相似的凋亡增加的表型，两者对凋亡的调控表现出协同增效作用。c-FLIPs是PI3KC2A-STAMBP复合体参与调控细胞凋亡的关键效应分子。STAMBP调节c-FLIPs的泛素化水平，维持其在细胞内的稳定性，进而行使其抗凋亡的功能。本项目鉴定了一个新的c-FLIPs调控网络，脂激酶PI3KC2A、去泛素酶STAMBP、分选蛋白SNX7是其中的关键调控因子，它们相互协作，共同维持着c-FLIPs在细胞内的稳定性，在肝脏的早期发育过程中发挥着重要的生理功能。