藏药三味檀香散预处理改善心肌缺血再灌注损伤的钙稳态调节机制

心肌缺血再灌注损伤（IRI）是再灌注治疗难以回避的棘手问题，药物预处理作为解决这一难题的重要措施已成为研究热点。.藏药三味檀香散是藏医治疗"心热病"的经典传统药方，本课题组的前期研究却发现，三味檀香散预处理可以明显保护大鼠心肌缺血再灌注损伤，改善心室舒缩功能，提高心肌SOD和GSH-Px活性、降低NOS、iNOS、NO活性，减轻心肌线粒体损伤。三味檀香散预处理改善心肌缺血再灌注损伤的作用是否与其对抗再灌注引起的心肌钙超载、维持心肌细胞钙稳态有关？为了回答这一问题，本项目拟定研究三味檀香散预处理对缺血再灌注损伤心肌、缺氧复灌损伤心肌细胞钙离子有什么影响？对钙离子通道产生哪些影响？对肌浆网钙离子循环蛋白有什么影响？是否通过干预钙离子调控相关凋亡因子的表达而影响钙离子的变化？上述问题的解答可明确藏药三味檀香散改善缺血再灌注损伤作用与钙稳态调节的关系，阐明三味檀香散的药理作用靶点及相关的分子机制。

急性心肌缺血是冠心病致死的主要原因。三味檀香散是藏医临床治疗“心热病”的经典常用藏医药方。本项目以钙稳态在心肌缺血再灌注损伤发生中的重要作用为研究靶点，从整体-细胞-基因蛋白水平研究了藏药三味檀香散预处理改善缺血再灌注损伤的分子机制。整体水平的研究发现，三味檀香散预处理可以减轻缺血再灌注对心肌微观结构的损伤，其药理作用与其活化ERK蛋白、上调SERCA2a蛋白的表达、下调PLB和Ryanodine受体的表达、上调L-型钙通道和PMCA基因表达、下调NCX基因的表达、上调Bcl-2蛋白的表达有关、下调Bax蛋白和Caspase-3基因的表达有关。细胞水平的研究发现，三味檀香散预处理改善缺氧复氧对心肌细胞损伤的药理作用与其上调SERCA2a和下调Phospholamban的表达、上调L型钙通道基因和下调NCX基因的表达、下调促凋亡基因Caspase 3和Bax的表达的作用有关。离体心脏实验发现，三味檀香散预处理有明显的正性变力作用，可以提高缺血再灌注大鼠离体心脏的收缩和舒张功能，改善左室的顺应性，增加心肌的供氧量，其机制与减少氧自由基的产生和提高SOD活性有关。蛋白和基因水平的研究发现，三味檀香散预处理改善离体心脏缺血再灌注损伤的作用与其与其活化ERK蛋白、上调SERCA2a基因表达、下调Ryanodine受体2 mRNA和Phospholamban基因的表达、上调L型钙通道基因和下调NCX基因的表达、下调Caspase-3的表达有关。