γδT细胞在急性痛风性关节炎发病中的作用及其机制研究

Gout is prevalent and warrants more attention, in that it is closely associated with the development and progression of various chronic diseases, including metabolic disorders, cardiovascular diseases and renal impairment. However, the full scope of the disease mechanism remains obscure. In our previous studies, we have identified a decreased proportion of γδT cells in the peripheral blood of gouty patients experiencing acute attacks, and a fraction of IL-17+ cells in their synovial tissues. After review of the latest literature, we proposed that γδT cells participate in the development of gout, and that early chemotaxis of these cells to inflamed joints likely play a role in the development of acute gouty arthritis. To confirm this, we will look into the abnormal distribution of γδT cells in gout, and seek to elucidate how inflammatory cytokines exert their chemotactic effects on these cells to launch an episode of acute arthritis in a IL-17-mediated manner, using patients’ peripheral blood, tophi and synovial tissues, and γδT cell deficient Tcrd-/- mice. We will further investigate the potential of γδT/IL-17 intervention as a novel target therapy.

痛风因其高患病率，并与多种慢性病如代谢性疾病、心、脑血管和肾脏疾病发生发展密切相关，应是重点关注疾病。然而痛风的完整发病机制目前仍不明确。本课题组的前期临床研究发现，在痛风急性发作患者外周血中γδT细胞比例下降，在痛风患者关节滑膜组织中发现IL-17+细胞。结合国内外γδT细胞的最新研究结果，我们认为γδT细胞参与痛风发病，并推测γδT细胞早期趋化至炎症关节部位可能参与了急性痛风性关节炎的发病。为了证实这一假说，本课题组拟明确γδT细胞在痛风中的异常分布，通过患者外周血、痛风石和滑膜组织，以及γδT细胞缺失（Tcrd−/−）小鼠模型，系统阐明γδT细胞如何受炎症因子趋化并通过IL-17介导参与急性痛风性关节炎的发病，进一步完善痛风发病机制的理论体系，并初步探索干预γδT/IL-17等作为痛风新的免疫靶向治疗的可能。

痛风已是临床最常见的炎性关节病，与此相反的是，目前痛风基础研究多集中在急性痛风性关节炎的发病机制，包括炎性小体的激活、IL-1介导的炎症反应、中性粒细胞募集等，而急性痛风性关节炎所致的机体整体细胞水平及分子水平的变化过程以及痛风的急性发作是如何转为慢性痛风的过程等完整机制仍知之甚少。本研究的主要研究内容包括，γδT细胞及不同亚群是否确实参与急性痛风性关节炎发病，参与机制是否为炎症因子趋化γδT细胞到关节部位，并对关节部位的γδT细胞是否主要为IL-17+γδT细胞进行初探。 .本研究的重要结果及关键数据如下：①ILC、NKT、Monocyte及其亚型在急性痛风及健康对照中无明显差异，γδT及γδT2在急性痛风患者的外周血中比例下降。②急性期痛风患者γδT细胞比例下降（P=0.026），缓解期较急性期升高（P=0.016）；γδT1细胞比例在各分期均无差异；γδT2细胞在急性期明显下降（P<0.001），缓解期升高（P=0.016）。且γδT2比例与WBC、NEUT及MONO正相关，与总甘油三酯负相关。③关节液中γδT2细胞比例较外周血中明显升高（P=0.001）。④急性期痛风患者IL-17+γδT2细胞比例较正常对照明显升高（P<0.001），且关节液γδT2细胞中IL-17阳性的比例较外周血中γδT2细胞IL-17阳性比例有显著升高。⑤急性期痛风患者的γδT细胞的迁移能力较正常对照明显升高，其中以γδT2细胞的迁移能力升高更为显著。⑥痛风患者的关节液上清较急性期患者的血清相比，对不同亚型的γδT细胞的趋化能力有显著增强。该趋化作用是由细胞表面表达升高的CXCR3以及关节液中表达升高的CXCL10共同实现。.本研究的科学意义包括：证明了急性痛风发作时存在γδT细胞及亚群向关节局部异常趋化并释放炎症因子，造成关节局部炎症的现象，并有希望进一步通过对促炎细胞及因子的靶向治疗干预，实现痛风治疗的新靶点。在此基础上，我们还完成了对慢性痛风性关节炎动物模型的建立，为后续慢性痛风的机制研究提供基础。