雌激素受体α信号途径与缺氧诱导因子1α信号途径交互作用介导垂体瘤出血性转化

We previously reported that HIF-lα signaling pathway participated in the hemorrhagic transformation of pituitary adenomas. It’s well known that ERα signaling pathway plays an important role in the development of pituitary adenomas. Prestudy indicates that estrogen participates in the hemorrhagic transformation in pituitary adenomas via ERα. Whether there is interaction between HIF-lα and ERα signaling pathways, and whether the interaction mediate the hemorrhagic transformation in pituitary adenomas remain unclarified. This study will determine the effect of ERα signaling pathway in the hemorrhagic transformation of pituitary adenomas using ERα overexpressing and silencing ways, we will also examine the interaction between HIF-lα and ERα signaling pathways in pituitary adenomas, and observe the mediating role of the interaction in the hemorrhagic transformation of pituitary adenomas using xenografts of nude mice, chorioallantoic membrane assay and zebra fish models. Our study will give new pathogenesis of hemorrhagic transformation in pituitary adenomas, and provide potential targets for hemorrhagic transformation intervention in clinical practice.

我组前期报道缺氧诱导因子1α（HIF-lα）信号通路参与垂体瘤组织出血性转化的发生，而雌激素受体α（ERα）信号通路在垂体瘤发生发展过程中起着重要作用。预实验提示雌激素通过ERα参与垂体瘤出血性转化的发生。垂体瘤细胞中ERα信号途径与HIF-1α信号途径是否存在交互作用，且此交互作用是否介导垂体瘤出血性转化的发生？目前尚无报道。本项目通过ERα过表达和沉默技术检测其对出血性转化相关作用分子的影响，探讨ERα信号途径与HIF-1α信号途径之间的交互作用，以及上述交互作用在裸鼠皮下移植瘤、鸡胚血管生成模型和斑马鱼血管生成模型中对垂体瘤组织出血性转化的影响，本课题有助于揭示垂体瘤组织出血性转化新的发生机制，为垂体瘤组织出血性转化的临床干预提供新的标靶。

本课题以探讨ERα信号途径与HIF-1α信号途径的交互作用，及其对垂体瘤组织出血性转化的调控作用为研究重点，为垂体瘤出血性转化提出新的发生机制，也为其他类型出血性转化机制研究提供新的理论参考。我们发现ERα信号途径与HIF-1α交互作用能影响肿瘤出血性转化过程。过表达ERα能够升高HIF-1α的表达水平，沉默ERα能够降低HIF-1α的表达水平。HIF-1α过表达能够降低MMQ细胞ERα的蛋白表达水平，而HIF-1α沉默能够升高ERα的蛋白表达水平。缺氧培养能够诱导HIF-1α在mRNA和蛋白水平上调，而ERα的表达水平下调。本课题为出血性转化提供新的理论依据，为肿瘤出血性转化临床干预提供新的潜在标靶。.本课题还探讨了ERα与泌乳素受体的相互作用。我们发现雌激素，PRL以及垂体腺瘤微环境中的其他激素和生长因子可能影响雌激素受体和PRLR表达水平。此外，ERα或/和PRLR阻断可以增加MMQ细胞对溴隐亭的敏感性。由PAK1磷酸化诱导的ERα磷酸化可能参与雌激素/ERα与PRL/PRLR信号通路之间的交互作用。雌激素加PRL阻断疗法可能更有效地杀死垂体瘤细胞。这些结果可以帮助开发新的激素和分子靶向治疗泌乳素瘤。.我们还使用微珠从原代培养的人垂体腺瘤细胞中分离CD133 +巢蛋白+表型细胞。发现DSF在体外降低MGMT蛋白表达，致敏TMZ作用于人垂体腺瘤细胞和干细胞样细胞，而蛋白酶体抑制剂PS-341消除了DSF对MGMT的体外抑制作用。在原代培养的人垂体腺瘤细胞体内也证实了DSF的致敏作用。结果提示，DSF可以通过泛素蛋白酶体MGMT蛋白消除途径提高TMZ对人垂体腺瘤细胞和CD133 +巢蛋白+干细胞的抗肿瘤效果。DSF联合TMZ可能是一种有效的抗侵袭性垂体腺瘤的治疗策略。.我们还使用siRNA技术，在分选的CD133 + U87神经胶质瘤细胞中敲除NEAT1。在CD133 +人神经胶质瘤原代培养干细胞中发现更高的NEAT1RNA表达。此外，在CD133 +细胞中敲除NEAT1后，U87细胞导致菌落形成减少，G1期细胞周期阻滞和凋亡增加。此外miR-107的活化和失活CDK6蛋白增加。这些结果表明NEAT1敲除通过调节miR-107CDK6途径可以抑制神经胶质瘤细胞中的干细胞特性。