芥菜型油菜多室基因定位的研究

青海芥菜型多室油菜是一类优异的种质资源，除具有抗旱、耐瘠、黄籽等优良性状之外，还具有多室的特异性状。与普通芥菜型二室油菜相比，多室油菜的成熟角果内通常具有3～4个果室。研究表明，在相同的遗传背景下，芥菜型多室油菜的单株产量显著高于二室油菜的单株产量，因而多室性状的研究对于芥菜型油菜产量性状的改良具有重要意义。前人对于多室性状的研究多集中于多室性状的表现、子房的解剖学观察、多室性状的遗传规律等方面，而基于分子水平的研究较少，限制了对于多室性状的深入了解。本研究拟在前人获得的芥菜型油菜多室性状受1对隐性基因控制的遗传规律基础之上，利用AFLP技术与BSA相结合，对芥菜型油菜多室基因进行定位，为多室基因的克隆奠定基础；同时将获得的紧密连锁的标记转化为SCAR标记，为利用多室基因进行分子标记辅助育种提供有利条件。

多数芥菜型油菜的种质资源产生的角果具有2个果室，然而少数的芥菜型油菜也能产生具有3～4个果室的角果。芥菜型油菜角果果室数目的提高使得每果粒数增加，最终导致其单株产量的提高。因此，多果室品种的发展可能会成为提高芥菜型油菜产量的一条有效途径。“多室油菜”，一个源于青藏高原的芥菜型油菜地方品种，能够产生三室或四室的角果。遗传分析的结果表明，芥菜型多室油菜的多室性状受2对隐性基因控制，我们暂且将这2对基因命名为Bjln1和Bjln2。为了精细定位其中的一个多室基因Bjln1，利用芥菜型多室油菜（多室亲本）和新芥（二室亲本）构建了一个BC3分离群体。采用扩增片段长度多态性（AFLP）和集团分离混合分析（BSA）相结合的方法，获得了2个与Bjln1基因紧密连锁的分子标记。初步遗传连锁分析的结果表明，2个标记均位于Bjln1基因的同一侧。Blast 分析的结果表明，2个AFLP的标记序列与白菜的A7染色体末端Scaffold000019上的部分序列具有同源性。利用遗传连锁分析及BlastN分析的结果，同时借助白菜A7染色体的序列信息，我们发展了一系列简单重复序列（SSR）标记。共获得7个与目标基因紧密连锁的SSR标记，其中ln8与Bjln1基因共分离。ln7和ln9是目标基因两侧最近的标记，它们与Bjln1基因之间的遗传图距分别为2.0 cM和0.4 cM. 这些SSR标记分别被克隆、测序，定位到白菜的A7连锁群（相当于芥菜型油菜A基因组的J7连锁群）上。两侧最近的标记，ln7和ln9，被定位到白菜A7连锁群上一段208 Kb的区间内，这一区间可能包含有Bjln1基因。当前的研究，将会促进Bjln1基因的克隆；同时会加速通过分子标记辅助育种及遗传转化进行多室油菜育种的进程。