肥胖相关激素及炎症因子对小鼠下丘脑KISS-1/GPR54基因表达的影响

近年研究发现，下丘脑区域KISS/GRP54系统，可能是联系能量代谢和下丘脑-垂体-性腺轴功能之间的重要枢纽。大脑皮层信号、多种肥胖相关激素和神经递质，通过影响下丘脑KISS细胞和KISS/GRP54系统的表达，调节下丘脑-垂体-性腺轴的功能。肥胖既是一种能量代谢异常疾病，也是一种慢性炎症疾病，和男性性腺功能减退症以及女性多囊卵巢综合征的关系密切。肥胖可对下丘脑-垂体-性腺轴功能产生重大影响，但其中确切机制尚不明确。本研究拟通过体外培养细胞和整体动物模型两个层面，探索肥胖相关激素（Leptin、Agrp、GLP-1、糖皮质激素）和炎症因子（TNF-a、IL-6、FFA、醛固酮）对下丘脑区域KISS-1/GPR54系统的基因表达和对性腺轴功能的影响，探索肥胖相关激素和炎症因子对性腺轴功能影响的具体机制。

第一部分：在细胞水平，炎症因子对KISS-1表达的影响 结果显示：（1）LPS（10ug/ml）和地塞米松(10-6M和10-7M)可抑制KISS-1 mRNA和蛋白表达；（2）TNFα（100ng/ml）、IL-6 (10ng/ml，20ng/ml)和胰岛素(0.1mIU/ml，0.01mIU/ml）可增加KISS-1 mRNA和蛋白的表达；（3）GLP-1类似物（艾塞那肽，1ng/ml和10ng/ml），在6h一过性增加KISS-1mRNA和蛋白表达。这些结果提示，这些因子可能通过影响下丘脑细胞KISS-1表达，从而调控下丘脑-垂体-性腺轴的功能。第二部分：在细胞水平，炎症因子对GPR54（KISS-1受体）表达影响 结果： ①LPS(10和20μg/ml)和TNFα(20和100ng/ml)有增加GPR54mRNA和蛋白表达的趋势；IL-6(10ng/ml和20ng/ml)、地塞米松（10-6M和10-7M）和胰岛素(0.1mIU/ml和0.01mIU/ml)均增加GPR54mRNA和蛋白表达，②GLP-1(1ng/ml和10ng/ml)不影响GPR54蛋白的表达；这些结果提示，IL-6、地塞米松和胰岛素增加GPR54的表达，表明GPR54可以介导炎症因子及激素影响性腺轴功能的病理生理过程。第三部分：在动物水平，炎症因子及代谢激素对Kiss-1/GPR54/GnRH系统的影响 结果：LPS、Dex干预去势28天小鼠1月后，LH水平无显著变化；Kiss-1和GnRH神经元免疫组化结果提示，Kiss-1表达和GnRH表达有降低趋势。这些结果提示，LPS和Dex可通过 Kiss-1和GnRH神经元途径，下调性腺轴功能。