基于等离子体共振增强和纳米材料信号放大的化学发光成像检测多组分心血管疾病标志物新方法的研究

The detection of cardiovascular disease markers has played an important role in the field of scientific research and clinical diagnosis and treatment of cardiovascular disease. Combination diagnosis of multiple markers contributed to the distinction and diagnasis, risk stratification and prognosis of cardiovascular diseases. High sensitive detection methods could realize the analysis of low concentration of markers..In views of nanomaterial-based signal amplification and metal plasmon resonance enhanced chemiluminescence, this item used the disposable immunosensor as the substrate, loaded the detection antibody (Ab2) on the silver nanoparticles (AgNPs) conjugated multienzyme labelled DNA dendrimer as the signal probe, and developed a high sensitive chemiluminescence imaging immunoassay method to detect four cardiovascular disease markers simultaneously..Using cardiac troponin T (cTnT), myoglobin (Mb), creatine kinase isoenzyme MB (CKMB) and C reactive protein (CRP) as model analytes, the method could be applied to detect four cardiovascular disease markers simultaneously. The method achieved the unity of high throughput and high sensitivity, providing a new tool for clinical diagnosis, and could be used to study the interaction between the component of traditional materia medica and cardiovascular disease markers. It has great application prospect in the screening of equivalent combinatorial components (BECCs) in traditional materia medica.

心血管疾病标志物的检测已在心血管疾病的科学研究、临床诊治等领域发挥了重要作用。多组分心血管疾病标志物检测有助于心血管疾病的鉴别诊断、危险分层和预后判断。高灵敏心血管疾病标志物的检测方法，可实现对低浓度标志物的分析。.基于纳米材料信号放大和贵金属等离子体共振增强化学发光策略，本项目将检测抗体负载在多酶标记的树枝状DNA与银纳米粒子复合物的表面，以该纳米材料作为信号探针、以可抛式免疫传感器为基底，发展了一种可同时检测四种不同心血管疾病标志物的高灵敏化学发光图像免疫分析方法。.利用肌钙蛋白T(cTnT)、肌红蛋白（Mb）、肌酸激酶同工酶（CKMB）和C反应蛋白（CRP）作为模型分析物，该方法可实现对这四种不同标志物的同时测定。该方法达到了高通量和超高灵敏度的统一，为临床诊断提供了非常好的新方法。最终可延伸到中药成分与心血管疾病标志物的相互作用研究，在中药的等效成分群筛选中具有极大的应用前景。

据《中国心血管病报告2017》年报显示，我国心血管病患病率及死亡率仍处于上升阶段，心血管病死亡占居民疾病死亡原因的首位，高于肿瘤和其他疾病。今后10年心血管疾病患病人数仍将快速增长，防治形势依然严峻。鉴于心血管疾病具有“发病率高、死亡率高、并发症多”的特点，应对之早诊断、早治疗。.按照心血管疾病发生规律，在心血管疾病发生和发展的每一个阶段，都可能产生相应标志物，直接或者间接反映心血管系统的疾病状况，例如心肌肌钙蛋白T（cTnT）、C反应蛋白（CRP）等等。对这些标志物的含量进行准确可靠的检测，是心血管疾病诊断、鉴别、治疗、预后判断的关键。发展新型的简单、灵敏的心血管疾病标志物检测方法，对我国心血管病防治事业至关重要、意义深远。.本项目旨在将纳米粒子信号放大技术和化学发光免疫分析技术相结合，灵敏、准确地检测血清内心血管疾病标志物含量。基于纳米材料信号放大和贵金属等离子体共振增强化学发光策略，将检测抗体负载在模拟酶标记的纳米粒子复合物表面，以该纳米材料作为信号探针，以包被捕获抗体的传感器为基底，利用cTnT、CRP等抗原作为模型分析物，发展可检测一种或多种心血管疾病标志物的高灵敏化学发光免疫分析方法，为临床诊断提供快速经济的新技术新手段。.总体方案为：合成4种化学发光信号探针，它们或具备纳米材料信号放大性能，或兼具等离子体共振增强发光效果和纳米信号放大性能；将这些探针与化学发光及成像技术相结合，发展一系列高灵敏的单、多组分心血管疾病标志物检测方法。.此外，本项目还基于银纳米粒子催化化学发光增强体系，对临床上广泛用于心血管疾病治疗的丹参酮IIA磺酸钠建立了简单、准确、灵敏的检测新方法，对于其相关产品的生产及质量控制意义重大。