携带HSV-1TK和CD融合基因溶瘤性腺病毒体内分子成像和抑瘤作用

"溶瘤性腺病毒"不仅本身是肿瘤病毒治疗的方法之一，还可以作为载体携带治疗基因，当病毒在肿瘤细胞中复制的时候，所携带基因拷贝数也大大增加，另外随着病毒继续感染周围肿瘤细胞，目的基因也同时被转导到细胞中。为了增强在肿瘤中复制特异性和对肿瘤杀伤作用，拟构建一个携带HSV-1TK和CD融合基因，由人端粒酶逆转录酶（hTERT）启动子调控复制的腺病毒（命名为Ad.hTERT-TKglyCD）,用于范围广泛的肿瘤治疗，并利用体内分子成像方法，来监测病毒在体内复制、播散和治疗基因表达情况，用获得的信息优化治疗方案，提高肿瘤治疗效果。开展此项目，有希望研制出一个能对肿瘤杀伤效果好，特异性高的新型"溶瘤性腺病毒"，以及监测"溶瘤性腺病毒"体内使用安全性、复制特异性、所携带基因表达情况的新方法，为"病毒-基因治疗"能成熟应用于临床肿瘤治疗进行有益的探索。

“溶瘤性腺病毒”不仅本身是肿瘤病毒治疗的方法之一，还可以作为载体携带治疗基因，当病毒在肿瘤细胞中复制的时候，所携带基因拷贝数也大大增加，另外随着病毒继续感染周围肿瘤细胞，目的基因也同时被转导到细胞中。为了增强在肿瘤中复制特异性和对肿瘤杀伤作用，构建了一个携带HSV-1TK和CD融合基因，由人端粒酶逆转录酶（hTERT）启动子调控复制的腺病毒（命名为Ad.hTERT-TKglyCD）,用于范围广泛的肿瘤治疗，并利用体内分子成像方法，来监测病毒在体内复制、播散和治疗基因表达情况，用获得的信息优化治疗方案，提高肿瘤治疗效果。主要研究内容是(1).利用“报告基因”HSV-1TK评价使用gamma相机和SPECT方法对治疗基因CD表达“非直接成像”的可行性；(2).“报告基因”HSV-1TK体内成像监测“溶瘤性腺病毒”体内复制情况的可行性；(3).体内外研究Ad.hTERT-TKglyCD在肿瘤和正常细胞中复制的选择性；(4).Ad.hTERT-TKglyCD体内外抑瘤作用和前药使用的最佳时间和剂量。研究发现： 重组病毒Ad.hTERT-TKglyCD在肿瘤细胞中选择性复制和杀伤作用；重组病毒Ad.hTERT-TKglyCD体内对肿瘤的抑制作用；FIAU的集聚水平与HSV-1TK基因表达水平成正比。课题组所构建的新型腺病毒Ad.hTERT-TKglyCD治疗肿瘤范围广，应用前景好。并且结合了病毒治疗和基因治疗的优势，肿瘤治疗效果会明显提高。