CHD4在非小细胞肺癌增殖及转移中的作用及相关机制研究

Lung cancer has been the top killer in the world and non-small cell lung cancer is the most common histology. Our previous study detected the expression of CHD4 in cancer tissues of non-small cell lung cancer(NSCLC) patients and analyzed the correlation between CHD4 expression and other clinicopathological parameters. We found that CHD4 was firmly associated with patients’ overall survival, other clinicopathological parameters and could be used as an independent factor for prognosis of NSCLC patients, leading us to hypothesize that CHD4 may play a significant role in proliferation and metastasis of NSCLC. To identify this assumption, we design to establish the CHD4 over-expression and low-expression NSCLC cell lines and examine the proliferative and metastatic ability of these cells by in vivo and in vitro experiments. Further, we will determine the activation of RhoA/ROCK signaling pathway and measure the expression of its target genes to explore the potential mechanisms of CHD4 in promoting proliferation and metastasis of NSCLC. This study will have new insight into pulmonary cancer progression and help to find the new strategy to inhibit its development and prolong the overall survival of lung cancer patients.

肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，非小细胞肺癌是肺癌的主要类型。我们前期研究结果显示CHD4是非小细胞肺癌高度相关基因，临床组织标本检测也提示CHD4在肺癌组织中较癌旁组织中明显升高，并可作为独立预后因子预测患者预后。因此，我们推测CHD4在非小细胞肺癌增殖和转移中具有重要作用。本课题拟建立CHD4稳定高表达及干扰非小细胞肺癌细胞株，分别复制裸鼠肺癌转移模型和皮下实体瘤模型，观察CHD4对肺癌细胞增殖和转移的作用；利用上述稳定转染细胞株，体外实验观察细胞增殖、转移能力的变化，并通过分子生物学等技术探讨CHD4参与非小细胞肺癌增殖和转移的RhoA/ROCK相关信号通路机制。本研究将有助于进一步揭示肺癌增殖、转移的机制，确立CHD4在肺癌增殖、转移中的意义和地位，为肺癌诊断治疗提供新的思路和理论基础。

非小细胞肺癌是肺癌的主要类型，它的诊疗目前是热点与难点。本课题从临床和实验室两方面分析和探讨了CHD4与非小细胞肺癌发生发展的关系以及参与调节的相关机制。.应用高通量筛选技术发现CHD4是非小细胞肺癌高度相关基因（Z值6.08）；临床组织标本检测提示CHD4在肺癌组织中较癌旁组织中明显升高；临床意义分析提示CHD4与非小细胞肺癌的临床分期、肿瘤大小等多个临床因素密切相关；Kaplan-Meier法证实CHD4表达强度越强，患者整体生存期越短；多因素COX回归分析CHD4与预后相关性的结果证实CHD4可作为独立预后因子来预测患者预后（HR=1.85，p=0.024）。用CHD4稳定高表达及干扰的非小细胞肺癌细胞株，通过MTT法、迁移及侵袭实验检测细胞增殖和转移能力等变化，结果提示CHD4表达增高促进肺癌细胞增殖和转移，表达下降则抑制肺癌细胞增殖和转移；利用CHD4稳定高表达细胞株复制裸鼠肺癌皮下实体瘤实验模型，结果发现，CHD4高表达组比对照组瘤体平均体积（0.98±0.19vs.0.42±0.07(cm3）)及重量(1.12±0.76 vs.0.03±0.01(g))均明显增加。本课题又通过GO functional analysis、免疫组化、免疫共沉淀等方法探讨分析了CHD4发挥作用的潜在机制。结果提示：1.抑制CHD4表达降低了PHF5A、RhoA、ROCK、p-myosin等的表达，升高了下游E-cadherin的表达；2.降低PHF5A的表达可以下调RhoA/ROCK信号通路下游因子表达，但不能改变CHD4表达强度；3. CHD4可以与PHF5A相结合。结果说明：CHD4在非小细胞肺癌增殖和转移中的促进作用，可能是通过调节PHF5A进而调控RhoA/ROCK信号通路实现的。.本课题研究认为，CHD4是非小细胞肺癌高度相关基因，可以促进肺癌细胞增殖和转移，可作为独立预后因子来预测患者预后，通过PHF5A调控RhoA/ROCK信号通路是其调节非小细胞肺癌发生发展的可能机制之一。本课题研究确立了CHD4在肺癌增殖、转移中的意义和地位，为进一步完善非小细胞肺癌增殖和转移机制的研究以及相关肺癌诊断治疗提供了新的思路和理论基础。本研究按计划按时完成了预期目标，目前已发表SCI论著1篇，SCI收录会议摘要1篇，在国际权威会议交流1次，已培养硕士1名。