Pim-1调控肾脏树突状细胞NLRP3炎性小体在狼疮肾炎发病中的作用机制

Our previous reports have shown that activation of NLRP3 inflammasome is involved in the pathogenesis and progression of murine lupus nephritis (LN). The preliminary data indicate that Pim-1 expression is significantly elevated in diseased kidneys of lupus-prone NZB/W F1 mice and renal biopsies of LN patients, and Pim-1 down-regulation can inhibit the activation of NLRP3 inflammasome induced by dsDNA/anti-dsDNA in renal dendritic cells (rDCs) of lupus-prone mice. However, the role of Pim-1 in LN and the mechanisms by which Pim-1 regulates the activation of NLRP3 inflammasome are undefined. This project is designed to 1) explore the therapeutic effects of Pim-1 inhibitor or Pim-1 silencing on lupus-prone mice in vivo and their impact on the activation of NLRP3 inflammasome; 2) elucidate the regulatory mechanisms of Pim-1 in the activation of NLRP3 inflammasome induced by dsDNA/anti-dsDNA in rDCs; 3) analyze the associations of Pim-1 expression in the peripheral blood cells and renal biopsies with clinical data. This study aims to clarify the role of Pim-1 in the pathogenesis of LN and its molecular mechanisms in the regulation of NLRP3 inflammasome activation in order to provide the experimental basis for discovering novel targets in the treatment of LN.

我们前期的报道显示NLRP3炎性小体通路激活参与小鼠狼疮肾炎(LN)发病和进展。初步预实验发现Pim-1在NZB/W F1狼疮小鼠肾脏及LN患者肾组织中表达均上调，下调Pim-1抑制dsDNA/anti-dsDNA诱导的狼疮小鼠肾脏树突状细胞(rDCs)中NLRP3炎性小体激活。但Pim-1在LN中的作用及其调控NLRP3炎性小体的机制不明。本课题拟1).体内探索Pim-1抑制剂或基因沉默Pim-1对小鼠LN的治疗作用及对NLRP3炎性小体通路激活的影响；2).体外阐明Pim-1对双链DNA(dsDNA)/anti-dsDNA诱导的狼疮小鼠rDCs中NLRP3炎性小体激活的调控机制；3).分析LN患者外周血细胞和肾组织中Pim-1表达与临床资料的相关性。研究旨在阐明Pim-1在LN中的作用及其调控NLRP3炎性小体的分子机制，为探索LN治疗的新靶点提供实验依据。

系统性红斑狼疮(SLE）是常见的严重自身免疫性疾病，可引起全身多系统损害。这一疾病严重危害人们健康，尤其是女性健康，带来了沉重的社会经济负担。尽管目前SLE的治疗现状较过去几十年有显著改善，SLE的死亡率仍然较高，而狼疮肾炎(LN)是引起SLE不良预后的关键因素。传统的免疫抑制治疗尽管改善了LN的预后，但可能会带来严重的不良反应。目前LN的发病机制仍不明确，继续深入研究LN的发病机制将有助于探索新的有效的治疗靶点，为解决临床诊疗问题提供重要依据。Pim-1调节淋巴细胞的增殖和活化，然而 Pim-1在自身免疫性疾病中的作用尚不清楚。因此，本课题探索了Pim-1在狼疮性肾炎中的治疗价值。我们首先分析了易患狼疮的NZB/W F1小鼠、SLE患者的人外周血单个核细胞和狼疮性肾炎患者的肾组织中Pim-1的表达。在该狼疮模型中评估Pim-1抑制剂AZD1208的治疗效果。进行了体外分析以探讨抗dsDNA抗体阳性（anti-dsDNA +）血清诱导的Pim-1在小鼠和人足细胞中的机制。最后，使用MRL / lpr小鼠确认体内Pim-1抑制的治疗作用。结果显示，患病NZB/W F1小鼠的肾、狼疮患者外周血单核细胞和肾活检中的Pim-1较对照组表达均升高。 Pim-1抑制剂AZD1208减少蛋白尿、肾小球肾炎、肾脏免疫复合物沉积物和血清抗dsDNA抗体，同时抑制NFATc1表达和NLRP3炎性小体活化。此外，在小鼠和人类足细胞中，在抗dsDNA +血清刺激的情况下，Pim-1敲低抑制了NFATc1和NLRP3炎性小体信号传导。从机制上讲，Pim-1通过细胞内Ca2 +调节NLRP3炎性体激活。并且我们在MRL / lpr小鼠中重复出了Pim-1阻断的治疗作用。这些数据明确表明，Pim-1是LN发病机制的关键调节因子，靶向Pim-1 / NFATc1 / NLRP3途径可能成为治疗人类狼疮肾炎的新策略。