通过合成二对通用引物,以基因组DNA及总RNA为模板作PCR及进一步建立细胞内RT-PCR,从抗人C1q杂交瘤细胞扩增其轻、重链可变区基因(C1qVL-C1qVH),并克隆进pGEM-11Zf<1>。序列分析表明C1qVL、C1qVH全长333、337bp,其中C1qVL属鼠33/34基因家族衍生于L6胚系基因,为VK-J5重排,而C1qVH属IgVHIIB亚组,由V-D-JH3重热电厂产生。特别有意义的发现是,C1qVL、C1qVH同源性片段主要为自身抗体编码基因及胚系基因,揭示本研究抗C1q具有自身抗体基因特征。因而进一步克隆了其它株抗人C1q单抗V基因,其序列结构分析比较有助于探讨自身抗体V基因学说。将克隆片段构建进pBV220、pJLA502表达载体,表达片段具有抑制C1q溶血活性。应用FACS分析、原位杂交探讨了抗C1q抗体在自身免疫性肾炎中的调节作用。
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数据更新时间:2023-05-31
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