转移抗真菌的几丁质酶基因培育转基因西瓜的研究

本项目研究了不同豇豆品种几丁质酶粗提液对西瓜枯萎病菌生长的影响，提出了不同几丁质酶对该菌抑菌活性有强弱甚至有无之别。以不同浓度的该菌孢子和胞壁碎片混合液处理豇豆幼苗，再经热变性、硫酸铵沉淀，亲和层析程序纯化了经诱导的特异几丁质酶。该酶为碱性单体酶，等电点8.3，分子量33kD，N端序列为EQCGSQAGGA，属于I类几丁质酶。共纯酶液强烈抑制西瓜枯萎病菌，亦能程度不同地抑制棉花枯萎病菌、瓜类炭疽病菌，十字花科蔬菜炭疽病菌、茄子黄萎病菌等。BstXI、EcoRV和DraⅡ在编码共成熟蛋白质的基因序列上各有1个酶切位点。将此外源几丁质酶基因导入离体培养遗传转化受体系统西瓜组织的基因转移方法以农杆菌介导法为佳。