血液灌流对毒死蜱代谢动力学影响的研究

Chlorpyrifos (CPF) as the first kinds of recommended alternative of high toxic organophosphorus pesticides (OPP), the production and use is becoming more and more widely, as a result of poisoning also increased. Recently, hemoperfusion (HP) has been used for the treatment of organophosphorous poisoning. Previous studies use canine or rabbit as the experimental animal model by encheiresis under general anesthesia. For the cost and success rate of these models, they were not suit for the HP experiment. Most of these studies focus on the symptoms, signs, bio-chemical criterion and cholinesterase influence by HP, but the toxicokinetics changes due to HP receives relatively little attention. In this study, we want establish convenient, physiologic stable and economical animal models for HP, based on the principle of toxicology, toxicokinetics, hemopurification and technique of minimally invasive surgery. Then, HP animal models were exposed by CPF. The change rules of toxicokinetics parameters and organophosphorous poisoning responses influenced by different patterns of HP (HP in different times, HP time of duration or single/multi dose) was studied. The results will be use in the mechanism research and clinical use of HP for organophosphorous poisoning.

毒死蜱作为第一批推荐替代高毒农药的有机磷杀虫剂，生产和使用日益广泛，所造成的中毒也逐年增多。近年来有使用血液灌流用于毒死蜱等有机磷杀虫剂中毒救治的报道。既往研究使用的犬、兔全身麻醉下手术插管进行血液灌流，成本高、成功率低、适用性差。血液灌流对症状体征、临床生化和胆碱酯酶等有机磷中毒指标影响的研究较多，但针对毒死蜱代谢动力学影响的研究较少。本研究拟应用毒理学、代谢动力学和血液净化学的原理，通过表浅血管微创置入导管的技术，优化血液灌流参数，构建操作简便、对动物生理状态影响较小、经济实用的血液灌流动物模型。并在此模型基础上以毒死蜱作为有机磷杀虫剂的代表进行染毒，探索分别在毒物吸收、达峰和消除时相进行血液灌流、灌流持续时间的长短以及单次/多次血液灌流等因素对毒死蜱代谢动力学参数，中毒效应指标影响的规律。为探索血液灌流治疗的机制，指导有机磷中毒临床救治提供理论基础和数据支持。

毒死蜱作为第一批推荐替代高毒农药的有机磷杀虫剂，生产和使用日益广泛，所造成的中毒也逐年增多。近年来有使用血液灌流用于毒死蜱等有机磷杀虫剂中毒救治的报道。既往研究使用的犬、兔全身麻醉下手术插管进行血液灌流，成本高、成功率低、适用性差。血液灌流对症状体征、临床生化和胆碱酯酶等有机磷中毒指标影响的研究较多，但针对毒死蜱代谢动力学影响的研究较少。. 本研究构建了操作简便、对动物生理状态影响较小、经济实用的血液灌流动物模型，实验动物经血液灌流前后不同时间的血常规、电解质和其他生理生化指标未受影响，动物模型已获得国家发明专利。应用分析化学的基本原理，根据毒死蜱及其代谢产物的理化性质，建立了毒死蜱及其代谢产物的气相色谱检测方法，毒死蜱及其代谢产物在8分钟内得到良好分离，质量浓度在0.01~2.50 mg/L的线性范围内与峰面积内相关性良好，相关系数分别为0.999 7和0.999 8；最低检测限均为1μg/L；精密度RSD均小于10%；加标回收率分别为77.60%~106.16%和72.00%~99.86%。建立了毒死蜱及其代谢产物的超高效液相色谱检测方法，毒死蜱及其代谢产物在1.00~50.00mg/L的线性范围内相关性良好，相关系数均为0.999 9；检出限均为0.30 mg/L，定量限均为1.00mg/L，加标回收率分别为87.20%~103.08%和86.20%~99.28%。通过动物实验获取了毒死蜱在家兔体内的代谢动力学参数。在上述研究的基础上以毒死蜱作为有机磷杀虫剂的代表通过体外实验和动物实验探讨了不同灌流速度、不同灌流持续时间和不同毒物浓度等因素对毒死蜱代谢动力学参数，中毒效应指标影响的研究，结果发现：毒死蜱在吸收人血后迅速分布到其他组织，然后缓慢代谢排出体外，毒死蜱在家兔体内的代谢过程符合二室模型的特征。血液灌流组毒死蜱达峰时间为(7.19±3.74)h，峰浓度为(1.37±0.56)mg/L，清除率为(13.93±10.27)L/h/kg，表观分布容积为(418.18±147.15)L/kg，与对照组比较，差异有统计学意义(P<0．05)。血液灌流可以降低毒死蜱在家兔体内的负荷量，减少内暴露水平。. 本研为探索血液灌流治疗的机制，指导有机磷中毒临床救治提供理论基础和数据支持。